不同兒茶素對人體血小板聚集活性的影響.pdf

1、隨著人們生活水平的提高和飲食習慣的改變，血栓性疾病已成為威脅人們健康的首要疾病，血小板的異常激活是此類疾病的病理基礎(chǔ)，抗血小板藥物成為了治療相關(guān)血栓性疾病的主要手段。流行病學及許多臨床研究表明，長期飲茶對于心血管疾病如動脈粥樣硬化等能起到預防和治療作用，茶葉中的茶多酚尤其是兒茶素對此發(fā)揮了重要的作用。茶葉中的兒茶素按照化學結(jié)構(gòu)及空間構(gòu)型的不同，分為很多種不同的種類，其中，研究最為廣泛且在茶葉中含量最多的是表沒食子兒茶素沒食子酸酯(Epi

2、gallocatechin gallate，EGCG)。
　　本文基于前人的研究，選取包含EGCG在內(nèi)的六種兒茶素，分別為兒茶素(Catechin, C)，表兒茶素(Epicatechin，EC)，表沒食子兒茶素(Epigallocatechin，EGC)，兒茶素沒食子酸酯(Catechin gallate，CG)，表兒茶素沒食子酸酯(Epicatechin gallate，ECG)，從結(jié)構(gòu)上了比較六種兒茶素單體對血小板功能影響的

3、差異，并對其可能的作用機制進行了深入探索。利用血小板激活劑ADP，凝血酶，膠原及U46619誘導血小板聚集，通過添加不同濃度的兒茶素預孵育血小板，測定其對血小板的聚集活性的影響。結(jié)果表明:在0-150μM的濃度范圍內(nèi)，EGC、CG、ECG和EGCG呈現(xiàn)濃度依賴性地抑制由ADP引起的血小板聚集，其中，EGCG抑制作用最強;在由凝血酶誘導的血小板聚集中，EGCG在50μM時對血小板聚集產(chǎn)生抑制作用，其它五種兒茶素沒有表現(xiàn)出顯著的抑制效果;在

4、U46619引起的血小板聚集中，CG和EGCG都能在50μM表現(xiàn)出對血小板的抑制作用，且作用效果CG＞EGCG;用膠原誘導血小板聚集時，CG，ECG和EGCG對血小板聚集產(chǎn)生了明顯抑制，有效抑制濃度都是50μM，抑制效果:CG＞ECG＞EGCG。研究發(fā)現(xiàn)，兒茶素對ADP引起的血小板聚集抑制效果較好，因此在ADP信號通路上繼續(xù)研究其可能存在的抗血小板作用機制。六種兒茶素分別與阿司匹林共同作用于血小板，EGC和ECG可能和阿斯匹林具有相似的

5、作用通路，通過作用于COX-1抑制TxA2的生成起到抗血小板的作用，而CG和EGCG則可能通過除COX途徑的其它信號通路對血小板活性產(chǎn)生影響;同時，EGC、CG、ECG和EGCG在100μM下都能夠顯著抑制血小板在纖維蛋白原上的鋪展，表明四個物質(zhì)可以抑制血小板從外到內(nèi)的信號通路(Outside-in signaling);用流式細胞儀檢測PAC-1和P-選擇素在血小板上的表達，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，只有EGCG能顯著抑制P-選擇素在血小板上的表達，

6、ECG和EGCG可以抑制PAC-1的表達，抑制作用EGCG＞ECG;免疫蛋白實驗對ADP的信號通路進行檢測，發(fā)現(xiàn)EGC、CG、ECG和EGCG可以抑制Akt473/308、p38、Erk和PKC基質(zhì)的部分蛋白的磷酸化;CG，ECG和EGCG可以抑制由ADP誘導的血小板cAMP的下降。研究表明，所選取的六種兒茶素，含有沒食子酰基的兒茶素(CG，ECG，EGCG)和不含沒食子酸但是在B環(huán)含有三羥基的ECG都具有抗血小板聚集的功效，這種特異性