FKN與百草枯中毒肺損傷的相關性研究.pdf

1、目的：
　　百草枯(paraquat，PQ)是全世界較為普遍使用的接觸性脫葉劑及除草劑，屬有機雜環(huán)類，毒性較強，人畜均可中毒，預后差，治療困難。PQ吸收后主要蓄積在肺內，且不易清除，呼吸系統(tǒng)出現(xiàn)的癥狀在中毒后最為明顯，中毒的主要死因是急性肺泡炎和急進性肺間質纖維化。百草枯中毒肺損傷的發(fā)病機制尚不完全清楚。目前認為在PQ中毒的發(fā)病過程中，炎癥反應占有重要地位，有關PQ中毒的相關研究已逐漸傾向于對“炎性細胞因子網(wǎng)絡失控”的關注。

2、>　　不規(guī)則趨化因子FKN（fractalkine，又稱CX3CL1），是炎性因子網(wǎng)絡的成員之一，屬趨化因子CX3C亞族，具有促進白細胞的黏附、轉運，影響活性氧簇，加快炎性因子的滲出等多種生物學作用，與疾病的發(fā)生發(fā)展關系密切，但FKN與百草枯中毒肺損傷的相關性研究，在國內外的文獻中罕見報道。本研究的目的旨在探討FKN在百草枯中毒致大鼠肺損傷早期的分布及表達規(guī)律，以說明FKN在PQ中毒致急性肺損傷過程中的作用。
　　方法：
　

3、　SPF級健康成年雄性SD大白鼠66只，隨機分成染毒組（36只）和對照組(30只)。染毒組以百草枯22mg/kg腹腔注射染毒，對照組給予等量的生理鹽水。每組按觀察時間點(染毒后6h、12h、24h、72h、120h)隨機分為5個亞組，染毒72h組8只大鼠，染毒120h組10只，其它亞組各6只。至觀察終點，剔除5只死亡的大鼠及1只因在麻醉及取材過程中不順利的大鼠，各亞組均保留6只入組觀察。取材后，HE染色觀察肺組織病理學變化并進行肺損傷病

4、理評分，測定肺臟系數(shù)，ELISA法測定血清及肺組織勻漿FKN含量，免疫組織化學染色觀察FKN及NF-κBp65在肺組織中的表達。應用SPSS19.0軟件處理實驗數(shù)據(jù)，Excel2007繪制統(tǒng)計圖。
　　結果：
　　1、肺組織HE染色:
　　病理變化:染毒組大鼠6h即出現(xiàn)炎性細胞浸潤，程度較輕，肺泡結構清晰，無明顯充血水腫，隨著染毒時間的延長，病情進行性加重，至120h已表現(xiàn)為大量炎細胞浸潤，肺泡結構破壞，組織充血水腫。

5、對照組大鼠各觀察時間點間無明顯變化，肺組織結構清晰，無炎性細胞浸潤等肺損傷表現(xiàn)。肺損傷病理評分:染毒組大鼠各觀察時間點的肺損傷病理評分呈逐漸增高趨勢，明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義。
　　2、肺臟系數(shù):
　　染毒組大鼠各觀察時間點的肺臟系數(shù)呈逐漸增高趨勢，明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義。
　　3、血清及肺組織勻漿FKN含量:
　　染毒組大鼠各觀察時間點血清及肺組織勻漿中FKN含量呈逐漸增高趨勢，明顯高于對

6、照組，差異具有統(tǒng)計學意義。
　　4、肺組織FKN及NF-κBp65免疫組化表達:
　　FKN主要表達在支氣管和肺泡上皮細胞、肺小動脈內皮細胞中，NF-κBp65主要表達在支氣管和肺泡上皮細胞及肺泡巨噬細胞中，二者在對照組中僅少量表達，染毒組中表達量增多。在染毒組中，二者的平均光密度值(MOD)在各觀察時間點呈逐漸增高趨勢，明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義。
　　5、相關性分析:
　　肺臟系數(shù)與肺損傷病理評分之間