鹽堿環(huán)境中蒽降解菌的篩選及降解機(jī)理研究.pdf

1、石油污染是一種危害十分嚴(yán)重的污染。它可以污染土壤，地下水和空氣，導(dǎo)致植物和海洋生物死亡，危害人體健康以及帶來(lái)非常嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。石油對(duì)土壤的污染主要來(lái)自石油組成成分中的多環(huán)芳烴、環(huán)烷烴等，其中 PAHs因?yàn)榫哂腥?致畸，致癌，致突變)效應(yīng),對(duì)環(huán)境的危害更大。20世紀(jì)80年代初美國(guó)環(huán)保局發(fā)布了129種優(yōu)先監(jiān)測(cè)污染物，其中有16種就是 PAHs。之后PAHs也被我國(guó)列入優(yōu)先檢測(cè)環(huán)境污染物黑名單中。由于多環(huán)芳烴的穩(wěn)定性和疏水性,造成其能持久

2、的存在環(huán)境中,特別是高分子量的三環(huán)和三環(huán)以上多環(huán)芳烴的大量積累。蒽是一種具有3個(gè)苯環(huán)的典型的多環(huán)芳烴物質(zhì)，已經(jīng)被 ECHA（歐洲化學(xué)品管理局）列為第一批 SVHC（高度關(guān)注物質(zhì)）。蒽因?yàn)榉肿恿扛?、水溶性差、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定等特點(diǎn)，所以很難被微生物降解。
　　天津是典型的鹽堿化城市，鹽堿化面積達(dá)到4220.387平方公里，占全市面積的35.9％左右。而有研究表明天津土壤已經(jīng)受到一定程度多環(huán)芳烴污染。因此研究鹽堿環(huán)境中多環(huán)芳烴的微生物降解對(duì)修

3、復(fù)天津地區(qū)石油污染的土壤有重要意義。
　　本文從天津團(tuán)泊湖地區(qū)的表層土壤中采取土樣，以無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基（MM）為液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基pH為8，NaCl濃度為2%，篩選可以以蒽為唯一碳源生長(zhǎng)的細(xì)菌。經(jīng)過(guò)富集培養(yǎng)和極度稀釋?zhuān)粩喾蛛x純化，篩選得到一株純菌， PCR擴(kuò)增后得到的序列在NCBI上比對(duì)，結(jié)果顯示與Demequina sp.AWV2菌株有99%的相似性。將 LB分別稀釋1倍、10倍、100倍、1000倍，培養(yǎng)細(xì)菌，發(fā)現(xiàn)隨著稀釋倍數(shù)的

4、增大，細(xì)菌濃度升高。在 pH為8，鹽濃度為2%的培養(yǎng)基中，設(shè)置4個(gè)污染物濃度梯度，分別為25、50、75、100mg/L,培養(yǎng)細(xì)菌，結(jié)果顯示，25mg/L時(shí)細(xì)菌的生長(zhǎng)速率最快，降解率最高，蒽濃度為100mg/L的培養(yǎng)基中細(xì)菌濃度最高，為3.02×108cells/mL。添加葡萄糖外加碳源后，發(fā)現(xiàn)細(xì)菌的生長(zhǎng)速率變快，降解率降低。
　　分析氣相質(zhì)譜圖發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌代謝蒽的過(guò)程中產(chǎn)生了9,10-蒽醌，鄰苯二甲酸酯，鄰苯二甲酸等酸性物質(zhì)。雙加