電針對潰瘍性結(jié)腸炎模型小鼠脾臟淋巴細(xì)胞Treg-Th17免疫平衡的影響研究.pdf

1、目的：
　　研究電針對潰瘍性結(jié)腸炎（Ulcerative Colitis,UC）模型小鼠的治療效應(yīng)，并從穩(wěn)定調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cell,Treg)與輔助性Th17細(xì)胞（The helper17cells,Th17）免疫平衡的角度，探討電針治療UC的作用機制，為臨床針灸治療UC提供更有益的科學(xué)依據(jù)。
　　方法：
　　24只健康雄性昆明小鼠，采用濃度為3％的葡聚糖硫酸鈉（Dextran Sulfate

2、 Sodium，DSS）法建立UC模型。造模5天成功后，再隨機分為兩組，分別為模型組、電針組，每組8只小鼠，另選擇體重年齡相當(dāng)?shù)?只健康雄性小鼠作為空白組。電針組選取“關(guān)元、足三里”連續(xù)治療5d，每日于固定時間治療10min，余兩組只捆綁不治療。觀察各組小鼠體重、大便粘稠度及便血情況，根據(jù)疾病活動指數(shù)（Disease Activity Index，DAI）評分表計算疾病活動指數(shù)；剖取結(jié)腸，觀察結(jié)腸大體形態(tài)；摘取脾臟，觀察脾臟大體形態(tài)。研

3、磨脾臟，分離脾臟淋巴細(xì)胞制備細(xì)胞懸液，采用FITC、PE、PerCP-cy5.5標(biāo)記CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞及其相應(yīng)同型對照PE Rat IgM同型對照-CD25、Rat IgG2a K同型對照PerCP-cy5.5-Foxp3，采用FITC、PE、PerCP-cy5.5標(biāo)記CD3+CD8+IL-17+Th17細(xì)胞及其相應(yīng)同型對照Rat IgG2a K同型對照PerCP-cy5.5-IL-17，刺激孵育、重懸洗滌脾單核

4、細(xì)胞懸液，運用流式細(xì)胞術(shù)檢測小鼠脾臟淋巴細(xì)胞Treg、Th17細(xì)胞含量。
　　結(jié)果：
　　1.電針對DSS誘導(dǎo)潰瘍性結(jié)腸炎小鼠的治療效應(yīng)：
　?。?）一般情況：模型組小鼠精神欠佳，毛發(fā)晦暗，懶動少食，體重下降，便質(zhì)稀軟，見肉眼血便，DAI指數(shù)明顯升高，與模型組相比，電針組小鼠精神轉(zhuǎn)佳，毛發(fā)較有光澤，便質(zhì)較干軟，肉眼血便明顯改善，DAI指數(shù)明顯降低，分析后有統(tǒng)計學(xué)差異（p＜0.05）。
　?。?）結(jié)腸大體形態(tài)觀察：

5、通過觀察比較每組結(jié)腸大致形態(tài)，與空白組相比，模型組小鼠結(jié)腸長度變短，腸壁略腫脹，腸粘膜潰瘍充血。與模型組相比，電針治療UC模型小鼠后，結(jié)腸長度、腸壁腫脹度、腸黏膜充血潰瘍糜爛情況均有所好轉(zhuǎn)。
　?。?）脾臟大體形態(tài)觀察：通過觀察比較每組脾臟大致形態(tài)可知，與空白組相比，模型組小鼠脾臟出現(xiàn)腫脹，紅潤度減少，表面粗糙，與模型組相比，電針組小鼠脾臟腫脹減輕，紅潤度恢復(fù)，表面較光滑。
　　2.電針調(diào)節(jié)DSS誘導(dǎo)潰瘍性結(jié)腸炎小鼠脾臟Tr

6、eg/Th17免疫平衡：
　　與空白組比較，模型組CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞含量明顯下降，CD3+CD8+IL-17+Th17細(xì)胞水平明顯上調(diào)，分析后有統(tǒng)計學(xué)差異（p＜0.05）；電針治療后，CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞含量上升，CD3+CD8+IL-17+Th17細(xì)胞含量下降，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　電針治療UC模型小鼠療效確切，與改善脾臟Treg/Th17