基于分子印跡識別兩類天然兩親性化合物的初步研究.pdf

1、目的在本研究中，針對部分天然化合物的兩親性特征，我們將結合分子印跡技術(molecular imprinting technique,MIT)，嘗試采用表面分子印跡策略來構建一種對兩親性模板分子具有較高識別和結合的印跡聚合物(MIPNPs)。這一策略的優(yōu)點在于，對于兩親性的模板分子，采用反相微乳液聚合法制備聚合物的過程中，模板分子將傾向于停留在兩相界面（親水端嵌于材料內(nèi)部，疏水端暴露于表面），當除去模板分子后，在MIPNPs的表面或近表

2、面則會留下與模板分子（親水部分）相同的“孔穴”。由于MIPNPs的識別位點位于聚合物表面，因此能夠有效地改善傳統(tǒng)方法中模板分子過度包埋和不易脫除等問題，在實際應用中更好的實現(xiàn)對模板分子的識別與分離。
　　方法與結果在本課題的第一部分研究中，我們將從銅綠假單胞菌細胞壁中得到的具有兩親性的脂多糖分子，作為模板分子，制備得到的脂多糖MIPNPs形態(tài)較為圓整，大小均一，分布均勻，平均粒徑為(38.31±2.13)nm，分散性P DI為(0

3、.112±0.102)。經(jīng)熒光偏振技術和微量熱泳動技術的研究測定，與非印跡聚合物NIPNPs相比，制備所得的脂多糖MIPNPs對LPS表現(xiàn)出了較好的特異性結合能力。流式細胞技術研究顯示，銅綠假單胞菌對脂多糖 MIPNPs具有較好的攝取。在上述基礎上，我們構建了銅綠假單胞菌小鼠腦膜炎模型，將包載熒光素的脂多糖MIPNPs以靜脈注射的方法注入模型小鼠體內(nèi)，活體成像顯示，在模型小鼠的病灶部位（腦部）有較多的熒光分布，表明，脂多糖MIPNPs在

4、體內(nèi)對模板分子也具有較好的識別能力。
　　上述研究顯示，針對兩親性模板分子——脂多糖，由反相微乳液聚合法制備得到的結合位點位于材料表面的分子印跡聚合物，對模板分子在體內(nèi)外均表現(xiàn)出了良好的靶向識別能力，表明這種制備工藝和策略方法具有較好的可行性和研究成果。
　　在本課題的第二部分研究中，我們將人參中主要的兩親性化合物——人參皂苷，作為模板分子，來制備MIPNPs。研究中，以人參皂苷Rg5作為模板分子，采用反相微乳液聚合方法制備

5、得到的Rg5-MIPNPs，具有較好的粒徑分布，且對模板分子Rg5表現(xiàn)出了較高的親和力。我們用另一人參皂苷R1和具有相似結構的甘草酸GA對Rg5-MIPNPs的選擇性進行驗證，結果顯示，Rg5-MIPNPs僅對Rg5表現(xiàn)出了特異的結合性，而對同樣的兩親性分子R1和GA則沒有特異性吸附。在此基礎上，我們將制備得到的Rg5-MIPNPs進一步制備得到凝膠柱，考察其對實際樣品的分離效果。結果顯示，以Rg5為模板分子制備并填充的凝膠柱，對Rg5

6、具有較好的特異性識別分離能力。
　　結論本課題研究針對部分天然化合物的兩親性，結合分子印跡技術，采用表面分子印跡策略成功制備得到了對兩親性模板分子具有較高識別和結合的印跡聚合物。一方面，以脂多糖為模板，制備得到的脂多糖印跡聚合物，對模板分子在分子水平和細胞水平上均具有較高的特異性識別結合能力。初步實現(xiàn)了對目標細菌的體外靶向作用以及體內(nèi)病灶部位的位點識別作用，為靶向遞藥系統(tǒng)提供了新的研究思路。另一方面以人參皂苷為模板，制備得到的人參