阿托伐他汀對同型半胱氨酸作用下人臍靜脈內(nèi)皮細胞Bcl-2啟動子甲基化水平的影響及其抗動脈粥樣硬化機制.pdf

1、目的:探討阿托伐他汀對同型半胱氨酸（Hcy）作用下人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)Bcl-2基因啟動子區(qū)甲基化水平及其表達的影響，闡明阿托伐他汀抗動脈粥樣硬化(AS)的可能機制。
　　方法：以HUVEC作為研究對象，分別用含有0、2、4、8、16和32 mmol·L-1Hcy的RPMI1640培養(yǎng)液對HUVEC作用48h，行MTT實驗計算細胞增殖抑制率及半數(shù)抑制濃度(IC50)，根據(jù)IC50結(jié)果將本實驗分為對照組(0mmol·L-1

2、Hcy)、Hcy組(9.00mmol·L-1Hcy)、阿托伐他汀組(9.00mmol·L-1Hcy＋1×10-3mmol·L-1阿托伐他汀)。各組細胞培養(yǎng)48h后，流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡水平，熒光定量PCR法檢測Bcl-2基因的mRNA表達，Western blotting法檢測Bcl-2蛋白表達水平，甲基化特異性PCR(Methylation specific PCR,MSP)聯(lián)合巢式降落式PCR法檢測Bcl-2啟動子區(qū)甲基化水平。<

3、br>　　結(jié)果：與對照組比較，Hcy組細胞凋亡率上升(P＜0.01)， Bcl-2基因的mRNA及蛋白表達水平下降（P＜0.01），Bcl-2基因啟動子區(qū)甲基化水平降低（P＜0.01）。與Hcy組比較，阿托伐他汀組內(nèi)皮細胞凋亡率下降(P＜0.01)，Bcl-2基因mRNA及蛋白表達水平增加（P＜0.05），Bcl-2基因啟動子區(qū)甲基化水平升高(P＜0.05)。
　　結(jié)論：阿托伐他汀可通過調(diào)節(jié)Hcy作用下的HUVEC細胞Bcl-2基