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文檔簡介
1、目的:探討葉酸對同型半胱氨酸作用下的人臍靜脈內(nèi)皮細胞基因組總甲基化水平的影響。
方法:以人臍靜脈內(nèi)皮細胞株作為實驗對象,經(jīng)傳代后將其分為對照組(CON組)、實驗組(Hcy組)及葉酸干預(yù)組(FA組)。對照組給予RPMI1640培養(yǎng)液;用含有不同濃度的同型半胱氨酸的RPMI1640培養(yǎng)液對HUVEC作用48小時,經(jīng)MTT法測定不同濃度Hcy對HUVEC的增殖影響,并確定HUVEC抑制率50%時Hcy濃度(IC50),以IC50時H
2、cy濃度作為后續(xù)實驗組;葉酸干預(yù)組給予含有0.1mm01/L濃度葉酸的RPMI1640培養(yǎng)液及IC50時Hcy濃度的RPMI1640培養(yǎng)液一起作用HUVEC48小時,測定3組HUVEC的增殖情況;類似改進酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)檢測各組HUVEC的DNA甲基轉(zhuǎn)移酶活力和基因組總甲基化水平。
結(jié)果:同型半胱氨酸對人臍靜脈內(nèi)皮細胞的增殖能力有明顯的抑制作用(P<0.01),且呈明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系;葉酸可以拮抗同型半胱氨酸對
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