河南省HIV感染者并發(fā)弓形蟲感染狀況.pdf

1、背景：
　　艾滋病是挑戰(zhàn)人類健康最嚴(yán)重的疾病之一，至今全球約7000萬人感染，近3000千萬人因感染HIV病毒而死亡。我省又是艾滋病疫情高發(fā)省份之一，由于我省人口基數(shù)大，以及局部地區(qū)有爆發(fā)性感染，HIV感染者的絕對數(shù)很大，據(jù)河南省疾控中心數(shù)據(jù)，截至2014年10月31日，河南省累計確認(rèn)艾滋病感染者59380例，累計死亡18962例，HIV感染者累計報告數(shù)已位列全國第二，我省艾滋病的防控形式依然不容樂觀。隨著HIV感染者的不斷增加、

2、感染人群的不斷變化，艾滋病已成為最嚴(yán)重的制約我省政治、經(jīng)濟發(fā)展的公共衛(wèi)生問題之一，人們對其相關(guān)性疾病也更加重視。弓形蟲可寄生于人和溫血類動物的有核細(xì)胞內(nèi)，是HIV感染者較為常見的繼發(fā)感染病原體，弓形蟲腦膜炎也是艾滋病患者腦部發(fā)生病變的一種常見疾病，已成為AIDS患者死亡的主要原因之一。HIV是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒，侵入機體后的增殖過程中機體的CD44+淋巴細(xì)胞遭到大量的破壞。當(dāng)HIV感染到骨髓干細(xì)胞時，可抑制CD4+T淋巴細(xì)胞的生成，從而造成

3、CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)量的進(jìn)行性減少。HIV感染者CD4+T淋巴細(xì)胞下降并且導(dǎo)致機體的免疫功能受到損傷時，機體免疫力下降，不但容易受到弓形蟲感染，而且患者體內(nèi)隱性感染弓形蟲的蟲體也會被激活。并且弓形蟲的感染本身就可以誘導(dǎo)免疫抑制，兩者相互促進(jìn)感染，形成惡性循環(huán)，最終導(dǎo)致艾滋病病人出現(xiàn)各種感染弓形蟲的臨床癥狀甚至死亡。
　　目的：
　　了解河南省HIV感染者弓形蟲的感染狀況，以及合并感染與CD4+T淋巴細(xì)胞和HIV病毒載量之間的

4、關(guān)系，為艾滋病的預(yù)防控制和診斷治療提供一些基本信息，對預(yù)防HIV的繼發(fā)弓形蟲感染、改善預(yù)后以及延長艾滋病病人生命、降低死亡率、提高艾滋病病人生命質(zhì)量有著重要意義。
　　研究對象：
　　1、實驗組:河南省1038份經(jīng)一步法（蛋白印記法）確證實驗證實的HIV感染者外周血液標(biāo)本。
　　2、對照組:河南省210份經(jīng)ELISA法HIV初篩陰性的健康體檢人員的外周血液標(biāo)本。
　　方法：
　　1、弓形蟲IgG抗體檢測

5、r>　　對實驗組和對照組的血清樣品弓形蟲IgG進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測，通過對兩組弓形蟲感染率的比較，驗證HIV患者與非HIV患者之間弓形蟲的感染率的是否存在差異，以及兩種疾病感染之間的關(guān)系。
　　2、血液弓形蟲DNA的檢測
　　建立單管一步法套式PCR的方法，擴增實驗組和對照組血液標(biāo)本的弓形蟲529bp片段。通過兩組弓形蟲感染率的比較，驗證HIV患者與非HIV患者之間弓形蟲的感染率的是否存在差異，以及兩種疾病感染之間的關(guān)系

6、。
　　3、HIV感染者血液中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)檢測
　　利用流式細(xì)胞儀提取并計算實驗組HIV感染者外周血標(biāo)本中CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)各自所占的比例，然后將實驗組分成兩個小組，比較弓形蟲檢測陽性和陰性兩組感染者之間的各個T淋巴細(xì)胞的數(shù)量是否存在差異，并用統(tǒng)計學(xué)的方法計算出弓形蟲感染對HIV感染者的T淋巴細(xì)胞的影響。
　　4、HIV感染者血液中病毒載量檢測

7、>　　檢測每個實驗組HIV感染者外周血標(biāo)本的HIV病毒載量，對各個數(shù)量級病毒載量標(biāo)本弓形蟲陽性率進(jìn)行相關(guān)性和顯著性分析，驗證弓形蟲感染對HIV患者的病毒載量是否有影響，以及兩者之間的相互關(guān)系。
　　5、HIV感染者感染方式與弓形蟲PCR結(jié)果的相關(guān)性分析
　　利用統(tǒng)計學(xué)方法分析HIV患者感染方式與弓形蟲PCR結(jié)果之間相關(guān)性。
　　結(jié)果：
　　1、弓形蟲抗體檢測:實驗組1014份HIV感染者（1038個HIV感染者2

8、4人未采集到血清樣品）弓形蟲抗體陽性者41人，陰性者973人，陽性率為4.04％;對照組210份非HIV感染者弓形蟲抗體陽性者10人，陰性者200人，抗體陽性率為4.76％。實驗組HIV感染者和對照組非HIV感染者之間，血清中弓形蟲感染陽性率(X2=0.224926,P=0.635312)沒有顯著性差異。
　　2、弓形蟲PCR檢測:HIV感染者弓形蟲PCR陽性率為6.36％，非HIV感染者弓形蟲PCR陽性率為8.09％(X2=0.

9、848702,P=0.356920)，兩者之間沒有顯著性差異。
　　3、HIV感染者血液中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)檢測:HIV感染者弓形蟲PCR陽性和陰性之間的CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)、以及CD4+/CD8+之間均無顯著性差異。不同CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)區(qū)間弓形蟲陽陰性之間無顯著性差異。
　　4、HIV感染者血液中HIV病毒載量檢測:病毒載量＜3log/mL、3-4log/mL、4-5log/m

10、L、＞5log/mL四個數(shù)量級所對應(yīng)弓形蟲IgG抗體檢測陽性率(X2=2.032309，P=0.565728)和PCR檢測陽性率(X2=6.192383，P=0.102616)無顯著差異。隨著CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)的增高，病毒載量呈下降趨勢，用統(tǒng)計軟件進(jìn)行相關(guān)回歸分析，CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)與病毒載量之間存在負(fù)相關(guān)(r=-0.36)。
　　5、HIV感染者感染方式與弓形蟲PCR結(jié)果的相關(guān)性分析:同性性行為方式弓形蟲感染率為8.9％，輸

11、血方式感染HIV弓形蟲感染率為2.8％，兩種感染途徑之間(X2=6.346623，P=0.01176)具有顯著性差異，其他HIV感染方式與弓形蟲感染無顯著性差異。
　　結(jié)論：
　　1、本實驗通過形蟲IgG抗體和PCR兩種方法對實驗組HIV感染者和對照組非HIV感染者進(jìn)行弓形蟲感染率的檢測并用軟件統(tǒng)計進(jìn)行分析，我省HIV感染者和非感染者感染弓形蟲的概率之間沒有顯著性差異。與其他相關(guān)報道對比分析，我省非HIV患者的弓形蟲感染率與

12、前人的研究大體相同，而HIV患者的弓形蟲的陽性率低于前人的研究。
　　2、對HIV感染者弓形蟲感染情況與外周血CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)和HIV病毒載量進(jìn)行統(tǒng)計分析顯示:①感染了弓形蟲對HIV患者的免疫系統(tǒng)的影響并不大，在對HIV患者的免疫系統(tǒng)的影響上AIDS依舊占主導(dǎo)地位;②HIV病毒在機體內(nèi)的活躍程度并不是機體感染弓形蟲的主要風(fēng)險因素;③IV感染者外周血CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)與病毒載量之間存在負(fù)相關(guān)。
　　3、通過對HIV感染者