澤瀉湯降血脂作用機理研究.pdf

1、1、相關的文獻研究
　　 高脂血癥是當今一種很常見的慢性疾病,其發(fā)病的原因是由于機體的脂質代謝紊亂,導致機體代謝失去平衡,有關的物質大量積累,弓}發(fā)脂肪肝、糖尿病、動脈粥樣硬化、高血壓及心血管疾病等,極大地威脅著人們的生命健康。高脂血癥的臨床表現(xiàn)為血清TC、TG的濃度較高,HDL-C的濃度較低。
　　 目前有較多的中藥及復方用于高脂血癥的治療,并取得了較好的療效。澤瀉湯是出自東漢醫(yī)圣張仲景《金匱要略》里的經典驗方,該藥方

2、由澤瀉、白術兩位中藥材配伍組成,澤瀉的作用重在利水下行、祛濕功效,可以使已停之飲從小便而去;白術的作用則重在健脾制水功效,可以使水濕既化而不復聚。該方最早用于治療昏冒眩暈,后來也用于治療高脂血癥,實際上是對澤瀉湯應用范圍的進一步擴大,用藥作用目的及機理基本相同。并經過長期的臨床驗證,證明該方有較好的降血脂作用。但是目前對澤瀉湯降血脂機理方面的研究文獻不多,且作用機理沒有得到較好地闡明,還處在初期的探索階段。普遍認為澤瀉湯降血脂的作用機理

3、有,澤瀉湯能影響外源性膽固醇的吸收,或者是澤瀉湯能干預機體對內源性膽固醇的分解代謝,同時澤瀉湯的降血脂作用還可能與其能提高機體的抗氧化能力,降低機體的氧化應激性有關。也有學者認為,一些中藥降血脂的作用機理還可能與藥物能對機體的肝,脾、腎的保護作用有關,調節(jié)這些器官功能的平衡,有助于維持機體正常的生理功能,調節(jié)脂質代謝紊亂等作用有關。用分子生物學手段研究澤瀉湯的進行作用機制也處在探索的階段。對肝臟中調節(jié)膽固醇合成的基因以及影響影響膽固醇合

4、成、促進膽固醇分解的關鍵酶等(如Hmgcr、Srebf2、Fasn、Cyp7a1等)的研究,是目前降血脂藥物機理研究的重點之一,對調節(jié)高脂血癥的關鍵基因進行研究可能是從根本上闡明藥物降血脂作用的有效方法。對澤瀉湯降血脂作用的機理的闡明一方面可以指導臨床用藥安全,另一方面也是尋找及開發(fā)新型降血脂藥物的有效途徑,具有重要意義。
　　 2、實驗部分
　　 2.1、澤瀉湯降血脂作用機理初步研究目的:通過澤瀉湯對高脂血癥小鼠血脂的

5、影響,初步探討澤瀉湯降血脂的作用機理。方法:采用高脂飼料喂養(yǎng)法建立小鼠實驗性高脂血癥模型,將高脂血癥小鼠分成6個組,分別為高脂血癥模型組,正常對照組,陽性組,澤瀉湯水提取物高、中、低三個劑量組。用澤瀉湯水提物高、中、低三個劑量組連續(xù)給藥4w,觀察并記錄各組小鼠的行為及生活狀況。摘眼球取血,分離血清,測定高脂血癥小鼠血清TC、TG、HDL-C、SOD、MDA、ALT、AST等生化指標,觀察各組織器官的病理變化及取部分肝臟用10％的福爾馬林

6、固定,石蠟包埋切片,HE染色后進行光鏡檢查。其余的臟器置于-80℃冰箱保存?zhèn)溆?。結果:給藥4w后,高脂血癥小鼠血清TC、TG顯著降低,HDL-C、SOD顯著升高,ALT、AST也顯著降低。
　　 結論:中藥澤瀉湯水提取物對高脂血癥小鼠有較好的降血脂作用,且高劑量組效果最好。其降血脂作用機理可能是對肝、腎、脾等臟器的保護,調節(jié)機體代謝平衡,以及改善機體抗氧化能力,減小氧化應激性等。
　　 2.2、澤瀉湯的LC-MS/MS指

7、紋圖譜的建立
　　 目的:通過建立澤瀉湯水提取物的LC-MS/MS指紋圖譜,標準化澤瀉湯降血脂的有效成分,為澤瀉湯降血脂作用機理的研究奠定基礎。方法:采用LC-MS/MS聯(lián)用技術,以實驗一中使用的澤瀉湯水提取物為樣本,建立澤瀉湯降血脂有效成分的指紋圖譜。結果:建立了澤瀉湯降血脂有效成分的指紋圖譜。結論:該方法建立的澤瀉湯指紋圖譜方便、可行,能有效地對澤瀉湯降血脂有效成分進行控制,標準化了澤瀉湯的各成分,對研究澤瀉湯降血脂作用以及

8、降血脂作用機制的研究提供了實驗依據(jù)。
　　 2.3、澤瀉湯降血脂作用機理研究
　　 目的:通過對澤瀉湯進行拆方與組方研究澤瀉湯的降血脂作用,探討澤瀉湯降血脂作用的機理。方法:對澤瀉湯進行拆分,先分別制備澤瀉,白術,以及復方澤瀉湯的水提取物。采用高脂飼料喂養(yǎng)法建立小鼠實驗性高脂血癥模型,將高脂血癥小鼠分成6個組,分別為高脂血癥模型組,正常對照組,陽性組,澤瀉湯水提取物組、澤瀉水提取物組、白術水提取物組。用澤瀉湯水提取物、澤

9、瀉水提取物、白術水提取物連續(xù)給藥4w,觀察小鼠的行為及生活狀況。摘眼球取血,分離血清,測定高脂血癥小鼠血清TC、TG、HDL-C、SOD、MDA、ALT、AST等生化指標,觀察各組織器官的病理變化及取部分肝臟用10%的福爾馬林固定,石蠟包埋切片,HE染色后進行光鏡檢查,各組織置于-80℃冰箱保存?zhèn)溆?。研究復方澤瀉湯水提取物、單一的澤瀉水提取物、白術水提取物對高脂血癥小鼠的血脂影響,并采用現(xiàn)代分子生物學技術,研究澤瀉湯等對調血脂的關鍵基因

10、(Hmgcr、Srebf2、Fasn、Cyp7a1)表達的影響。結果:澤瀉湯水提取物組仍然有較好的降血脂作用,澤瀉水提取物組也有較弱的降血脂作用,而白術水提物組基本沒有降血脂作用。澤瀉湯對高脂血癥小鼠肝臟中Hmgcr、Srebf2、Fasn的表達有較顯著地抑制作用,而對Cyp7a1的表達無顯著作用。結論:澤瀉湯有較好的降血脂作用,其降血脂作用與澤瀉和白術的配伍協(xié)同作用有關,其降血脂作用機理還與澤瀉湯能調節(jié)膽固醇的合成與代謝基因表達有關,