甘蔗梢腐病菌T-DNA插入突變體庫的構(gòu)建和分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、甘蔗梢腐病是世界范圍內(nèi)重要的經(jīng)濟作物真菌性病害，其病原真菌為輪枝鐮孢菌(F.verticillioides)和層出鐮刀菌(F.proliferatum)。通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化分別構(gòu)建了這兩個鐮刀菌種（菌株CNO-1和YN41）的突變體庫，并利用高效TAIL-PCR和菌落形態(tài)對突變體庫進(jìn)行鑒定。
　　結(jié)果分別構(gòu)建了庫容量為195的YN41突變體庫和庫容量為956的CNO-1突變體庫。從兩個突變體庫中分別隨機挑選6個轉(zhuǎn)化子，進(jìn)行P

2、CR鑒定，結(jié)果均為陽性。通過菌落特征和致病性篩選YN41和CNO-1突變體庫，鑒定出生長速度減慢且致病力下降突變體1個(A5)，生長速度減慢且致病力不變突變體1個(C8)，生長速度加快且致病力增強突變體2個(A1、A2)，菌絲變濃密且菌絲疏水性變?nèi)跬蛔凅w1個(A3);采用高效TAIL-PCR對這些轉(zhuǎn)化子的T-DNA側(cè)翼序列進(jìn)行擴增，獲得了A1、A2、A3突變體的T-DNA側(cè)翼序列，通過BLAST鑒定到其插入位點（下游）基因，這些基因分別

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