3D打印PLA-HA復(fù)合材料生物相容性及構(gòu)建組織工程骨的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討以骨髓基質(zhì)細(xì)胞作為種子細(xì)胞與3D打印PLA-HA復(fù)合支架材料的生物相容性；觀察3D打印PLA-HA復(fù)合材料體內(nèi)成骨性能，為進(jìn)一步在臨床修復(fù)大段骨缺損奠定理論基礎(chǔ)。
　　方法：將綠色熒光蛋白標(biāo)記的骨髓基質(zhì)細(xì)胞分別與3D打印PLA-HA復(fù)合材料以及β-TCP進(jìn)行體外復(fù)合培養(yǎng)，采用熒光顯微鏡、掃描電鏡、CCK8法以及堿性磷酸酶活性測定法檢測細(xì)胞的生長黏附、增殖力及堿性磷酸酶活性的變化；選擇新西蘭兔的脛骨內(nèi)側(cè)構(gòu)建體內(nèi)生物反應(yīng)器模

2、型。實(shí)驗(yàn)分為兩組：實(shí)驗(yàn)組包括骨髓基質(zhì)細(xì)胞、3D打印PLA-HA復(fù)合材料、骨膜以及隱血管束；對照組包括骨髓基質(zhì)細(xì)胞、3D打印PLA-HA復(fù)合材料、骨膜。待取材后，采取聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、顯微CT檢測法、HE染色分別行骨分化相關(guān)基因、骨形態(tài)計(jì)量分析和組織學(xué)觀察和檢測。
　　結(jié)果：3D打印PLA-HA復(fù)合材料在12h時的細(xì)胞粘附率可達(dá)到60％以上；其細(xì)胞增殖量在第4天和第7天與β-TCP組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；在復(fù)合培養(yǎng)的第3天，第7天和第14

3、天其ALP含量與對照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，且在第7天時其ALP活性較β-TCP組高。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)組OPN及COLⅠ的相對表達(dá)量較對照組多；顯微CT掃描結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組新生骨組織體積及骨小梁相對數(shù)目較對照組高；組織學(xué)觀察結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組有新生骨組織形成，部分新生骨組織為編織骨，骨細(xì)胞體積大，數(shù)量多，新生血管密度較多；對照組可見部分新生骨樣組織形成，骨細(xì)胞分化較成熟。
　　結(jié)論：3D打印PLA-HA復(fù)合材料具有良好的生物相容