金諾芬對(duì)斑馬魚(yú)胚胎的發(fā)育毒性研究.pdf

1、藥物毒性和臨床安全性是藥物開(kāi)發(fā)失敗的主要因素。金諾芬臨床上用于治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，并且作為一種抗癌藥物已經(jīng)完成Ⅰ/Ⅱ期臨床試驗(yàn)，但是有關(guān)金諾芬的發(fā)育毒性的研究較少，本文主要研究其發(fā)育毒性并以斑馬魚(yú)為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?br>　　研究方法:受精2h的斑馬魚(yú)胚胎分別加入不同濃度的藥物(1.0，2.5，5.0，10.0μM)至72 hpf。在72 h，我們觀察到斑馬魚(yú)胚胎出現(xiàn)了嚴(yán)重的心包膜水腫和色素減少這兩個(gè)發(fā)育毒性表型。依據(jù)表型缺陷，分別進(jìn)行生化檢

2、測(cè)，包括超氧化物歧化酶(SOD)與丙二醛(MDA)和基因表達(dá)檢測(cè)氧化應(yīng)激(sod1，gpx1a)、心臟發(fā)育（amhc，vmhc）、重金屬（hsp70，ctr-1）、色素形成(mitfb，trp-1a)相關(guān)的基因。
　　研究結(jié)果:生化檢測(cè)結(jié)果表明SOD活性在斑馬魚(yú)體內(nèi)減少，而MDA的含量增加。qRT-PCR基因表達(dá)檢測(cè)結(jié)果表明，當(dāng)加藥濃度大于2.5μM，氧化應(yīng)激相關(guān)基因、色素相關(guān)基因和一個(gè)金屬相關(guān)基因(ctr1)相對(duì)表達(dá)量均減少，心