Semaphorion 3A對兔下頜骨牽張成骨新骨形成的影響.pdf

1、背景和目的:
　　牽張成骨(DO)是在骨骼切開后保留骨膜以及附著于表面的血液供給骨段，對這段骨骼施加恒定的牽張力后可促進牽張的間隙中形成新骨。這一技術(shù)既避免了供區(qū)創(chuàng)傷及骨移植術(shù)的各種并發(fā)癥又使軟組織同步延長，為傳統(tǒng)方法不能解決的臨床問題提供了新的思路。這是一種內(nèi)源性的組織工程技術(shù)，在臨床頜面骨矯正和面部骨骼缺損畸形的治療中應(yīng)用廣泛，是顱頜面整復外科領(lǐng)域幾十年來重大進展之一。但牽張成骨作為一種新興組織工程技術(shù)，在許多方面還需要深入的

2、探索和研究，仍存在固定期時間過長、新骨形成不良等弊端，從而嚴重影響了該技術(shù)在臨床的推廣和使用。探索DO骨再生的細胞和分子機制，彌補牽張成骨治療的缺點，促進骨骼再生與骨骼的礦化，從根本上縮短治療的周期，是目前國內(nèi)外學者正努力探索的一個重要前沿課題。
　　有研究表明，骨組織的新陳代謝和新生作用受到神經(jīng)的支配，Semaphorion3A是一種神經(jīng)軸突導向性分子，是成骨細胞分泌的一種蛋白質(zhì)，該蛋白具有調(diào)節(jié)成骨細胞生理活動的作用，并且在感覺

3、神經(jīng)支配中具有重要作用，對骨骼的新生和改建具有直接或間接的調(diào)節(jié)作用。在進行全身治療時，Semaphorion3A在骨骼的愈合中還具有其他功能，如進行干細胞生理活動的調(diào)節(jié)、進行血小板活性的調(diào)節(jié)等。總的來說Semaphorion3A蛋白在骨骼重塑中扮演了重要的角色，所以在骨骼疾病的治療中是一種具有較大發(fā)展?jié)摿Φ陌袠宋镔|(zhì)。
　　本次實驗在建立兔單側(cè)下頜骨牽張成骨動物模型后，研究外源性Semaphorion3A對于牽張成骨的成骨效應(yīng)的影響

4、，為促進牽張成骨新骨形成和礦化，提高牽張間隙內(nèi)的成骨質(zhì)量，縮短牽張成骨治療周期提供科學的實驗依據(jù)，改進傳統(tǒng)治療的不足之處，通過客觀的數(shù)據(jù)分析，奠定臨床應(yīng)用的基礎(chǔ)。
　　方法:
　　1.動物模型的建立:選取20只5-6個月齡的健康的新西蘭大白兔，體重2～3kg，雌雄不限。全麻下在頦孔后方0.5～1厘米處切開下頜骨，固定內(nèi)置式牽張器。每旋轉(zhuǎn)一圈，牽張距離為0.4mm。延遲期為6天，從第7天開始，每天上午10點和下午8點各牽張0.

5、4mm，連續(xù)牽張10天，固定牽張器。
　　2.Semaphorion3A對牽張成骨新骨形成的影響:模型建立成功后，將實驗動物隨機分為A、B兩組，A組為空白對照組;B組為實驗組，在牽張期第1、5、10天在牽張間隙內(nèi)注射SEMA3A(500μg/Kg)。在固定期第2周和第6周分別獲取下頜骨標本，利用X線及組織形態(tài)計量學檢測等技術(shù)觀察比較外源性Semaphorion3A對于牽張成骨的成骨效應(yīng)的影響。
　　3.成骨效果檢測:獲取兔下

6、頜標本后立即行牽張區(qū)域骨密度的X線檢查。在光鏡下觀察每個組織標本的6張HE染色的不連續(xù)切片，其觀察指標包括成骨細胞的生長情況以及骨小梁的數(shù)量和大小、骨小梁排列的方向。在觀察以后進行拍照保存，使用圖像處理軟件對骨骼組織進行形態(tài)計量學分析，以新生骨量和骨小梁厚度作為測量參數(shù)，測量每個標本的6張不連續(xù)切片，測量參數(shù)值為均數(shù)。
　　4.統(tǒng)計數(shù)據(jù)分析:對實驗過程中的牽張器對骨密度的影響和骨形態(tài)的變化進行量化統(tǒng)計。數(shù)據(jù)采集及統(tǒng)計均采用盲法。計

7、量資料用均數(shù)±標準差表示，用t檢驗進行組間數(shù)據(jù)比較，對每組各時間點的差異進行統(tǒng)計并比較。本次選用的統(tǒng)計學軟件為SPSS19.0，對完全隨機的模型樣本進行統(tǒng)計學分析，分析結(jié)果P＜0.05為具有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果:
　　本次實驗模型組中選用的動物模型對手術(shù)的耐受程度較高，并且手術(shù)牽張后存活率為100％，模型兔大小便和飲食狀況良好，在進行了牽張手術(shù)后出現(xiàn)了不同程度的偏頜。使用X射線進行影像學檢查，發(fā)現(xiàn)注射Sema3A組的動物模