犬下頜牽張成骨中與新骨快速形成相關lncRNA的初步研究.pdf

1、目的:
　　建立犬下頜骨牽張成骨、下頜骨骨折模型及幼犬下頜骨及胚胎下頜骨模型，通過高通量測序找到牽張成骨期間可能激活的與新骨快速形成相關的因子及信號通路。
　　方法:
　　實驗共分為7組，其中實驗組分別為牽張固定0周組(D01)、牽張固定2周組(D02)、犬30天胚胎組(E)、幼犬2周組(P)、骨折固定2周（對應牽張組間歇期1周及牽張期1周）組(MF1)、骨折固定4周（對應牽張組間歇期1周、牽張期1周及固定期2周）組(

2、MF2)及對照組(AC)。每小組實驗動物為3只。D01和D02組中分別隨即選取3只健康成年中華田園犬，體重約15公斤，于其右側下頜骨施行下頜骨牽張成骨術。間歇期1周后開始以1mm/天速度將右下頜骨向近中方向牽張，牽張期1周共預計牽張7mm后牽張結束，處死D01組實驗犬并收集右下頜骨牽張區(qū)標本。D02組完成牽張后固定2周，固定期結束后拍攝錐形束CT觀察成骨情況，然后處死動物并收集右側下頜骨牽張區(qū)新生標本，記錄標本大體觀。MF1和MF2組分

3、別隨即選取3只健康成年中華田園犬犬，體重約15公斤，于其右側下頜骨施行下頜骨骨折手術，術式參考下頜骨牽張成骨，骨折間隙為7mm。分別于2周及4周后拍攝CBCT及處死取材，收集右下頜骨骨折間隙標本。E組為孕30天的母犬，拍攝B超確認天數(shù)后納入實驗組。P組為隨機選取3只同種出生2周健康幼犬納入實驗組。AC組隨機選取3只健康成年中華田園犬，體重約15公斤。處死E組、P組及AC組并收集各組右下頜骨標本。將7組標本進行高通量LncRNA測序檢測。

4、
　　結果:
　　1、D01、D02、MF1、MF2組動物均順利完成手術及術后隨訪觀察。術后沒有實驗犬出現(xiàn)相關嚴重并發(fā)癥，牽張器及鈦板固定牢固，未見松脫，亦未發(fā)現(xiàn)牽張器及鈦板的斷裂及變形。觀察所有實驗犬行牽張前和牽張后右側尖牙牙位及骨折手術前后右側尖牙牙位，可發(fā)現(xiàn)牽張后及骨折后下頜尖牙相對于上頜尖牙有明顯的近中前移，說明右側頜骨成功通過牽張及人為骨折延長。
　　2、從7組樣本中均提取出足量的總RNA，并分別成功構建了用

5、于lncRNA測序所需的cDNA文庫。成功完成了各組高通量IncRNA測序。
　　3、本項目7組樣品數(shù)據(jù)，總共有3504個lincRNA和3731個novel lncRNA有表達。
　　4、牽張組、胚胎組、幼犬組同正常對照組及骨折組相比差異表達的lncRNA中，TCONS_00170590有可能調控其靶基因Lix1參與牽張成骨的快速成骨過程。
　　結論:
　　1、LncRNA TCONS_00170590在D01