貴州天麻萌發(fā)菌優(yōu)良菌株的篩選.pdf

1、貴州為傳統(tǒng)天麻產(chǎn)區(qū),天麻有性繁殖技術(shù)在全省主要天麻產(chǎn)區(qū)被廣泛推廣應(yīng)用,但一直以來(lái),采用的萌發(fā)菌都來(lái)源于中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所或陜西漢中地區(qū)的紫萁小菇和石斛小菇,這些萌發(fā)菌對(duì)推動(dòng)貴州天麻有性繁殖起到了至關(guān)重要的作用。但近年來(lái),由于環(huán)境氣候的變化,導(dǎo)致很多產(chǎn)區(qū)外來(lái)萌發(fā)菌與天麻種子的親和性不穩(wěn)定,嚴(yán)重影響了天麻有性繁殖的產(chǎn)量;收集并選育出適宜貴州不同天麻產(chǎn)區(qū)的本地優(yōu)良萌發(fā)菌,是解決環(huán)境適宜性和與天麻親和性的關(guān)鍵。
　　本研究主要開(kāi)

2、展天麻種子自然萌發(fā)和生長(zhǎng)發(fā)育特性研究、萌發(fā)菌資源收集和優(yōu)良萌發(fā)菌菌株篩選及應(yīng)用。試驗(yàn)結(jié)果如下:
　　1、揭示烏天麻和紅天麻種子自然萌發(fā)和生長(zhǎng)發(fā)育特性,建立野生萌發(fā)菌收集方法。采用4℃保存、室溫保存、鮮種等3種不同方式處理的紅天麻和烏天麻種子原生地播種,通過(guò)不同時(shí)間取樣,觀察統(tǒng)計(jì)種子的萌發(fā)率、死亡率和萌發(fā)生長(zhǎng)指數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:天麻種子6月播種8月份有較高的萌發(fā)率,9月份種子萌發(fā)生長(zhǎng)指數(shù)高;不同溫度處理天麻種子其相對(duì)萌發(fā)率、死亡率、

3、生長(zhǎng)指數(shù)差異顯著;常溫儲(chǔ)存種子萌發(fā)生長(zhǎng)指數(shù)顯著小于4℃儲(chǔ)存與鮮種,4℃儲(chǔ)存與鮮種之間萌發(fā)生長(zhǎng)指數(shù)相近。結(jié)論:因此在5、6月份選擇鮮種或短時(shí)間冷藏種子播種有利于種子的萌發(fā),在9月份利于采樣,可以獲得理想的萌發(fā)菌分離材料。
　　2、在采用單菌絲團(tuán)分離法分離天麻原球莖菌根真菌的試驗(yàn)中,得出了不同致密度菌絲團(tuán)萌發(fā)所需時(shí)間不同,大多數(shù)萌發(fā)的時(shí)間在36h,菌絲團(tuán)剝離出來(lái)后將移入一新的無(wú)菌水中在18℃中進(jìn)行孵育萌發(fā)后才再將其吸取在小塊培養(yǎng)基上培

4、養(yǎng),可以減少內(nèi)生細(xì)菌的污染。將孵育的溫度控制在18℃同時(shí)孵育的水中加入青霉素和慶大霉素,且延長(zhǎng)菌絲團(tuán)的孵育時(shí)間。結(jié)果表明:在18℃時(shí),細(xì)菌生長(zhǎng)緩慢,雙抗抑制細(xì)菌生長(zhǎng),菌絲團(tuán)在18h開(kāi)始萌發(fā),41h大量菌絲團(tuán)都萌發(fā),少量的致密菌絲團(tuán)未萌發(fā)。
　　3、將收集的13個(gè)小菇屬真菌與本室分離獲得的1個(gè)小菇屬真菌,共14個(gè)小菇屬真菌,將其進(jìn)行生長(zhǎng)勢(shì)、遺傳多樣性、萌發(fā)菌胞外酶酶活性的比較、遺傳穩(wěn)定性比較、與紅天麻種子進(jìn)行促萌發(fā)效果間的比較,篩選