肉用綿羊主要生殖器官細(xì)胞凋亡特點(diǎn)的研究.pdf

1、雌性哺乳動(dòng)物生殖周期中，生殖器官發(fā)生明顯的周期性變化。細(xì)胞凋亡在這種周期性變化中發(fā)揮著重要的作用。本文采用DAPI原位熒光標(biāo)記技術(shù)和免疫組織化學(xué)技術(shù)，對(duì)高繁殖力品種小尾寒羊和低繁殖力品種薩?？搜虺赡昴秆蛑饕称鞴伲殉?、輸卵管、子宮）進(jìn)行細(xì)胞凋亡的確認(rèn)與定位，并對(duì)細(xì)胞凋亡基因Bad表達(dá)情況進(jìn)行了檢測(cè)。目的在于對(duì)母羊生殖器官周期性變化過程的細(xì)胞凋亡機(jī)制進(jìn)行探討，為闡述細(xì)胞凋亡對(duì)母羊繁殖力的影響提供理論依據(jù)。 DAPI原位熒光標(biāo)記

2、技術(shù)的研究結(jié)果表明：小尾寒羊和薩?？搜蚵殉仓新雅萆掀ぜ?xì)胞、顆粒細(xì)胞、膜細(xì)胞和黃體細(xì)胞均有凋亡現(xiàn)象。在三級(jí)卵泡和成熟卵泡的顆粒細(xì)胞和膜細(xì)胞中，薩福克羊比小尾寒羊表達(dá)出較多數(shù)量的凋亡細(xì)胞。黃體后期薩福克羊的細(xì)胞凋亡較小尾寒羊明顯。在薩?？搜螯S體期輸卵管各部位上皮中發(fā)現(xiàn)有極少數(shù)分泌細(xì)胞具有凋亡特征，而在小尾寒羊未檢測(cè)到凋亡細(xì)胞。黃體期兩品種羊輸卵管上皮下結(jié)締組織有少數(shù)凋亡細(xì)胞。兩品種羊在卵泡期輸卵管各部位均未檢測(cè)到凋亡細(xì)胞。在黃體期，小尾寒羊

3、和薩福克羊子宮內(nèi)膜的基質(zhì)與腺體內(nèi)皮中均檢測(cè)到大量凋亡細(xì)胞，而在卵泡期，兩品種羊的腺體中未檢測(cè)到細(xì)胞凋亡，子宮內(nèi)膜基質(zhì)中檢測(cè)到少量細(xì)胞發(fā)生凋亡。 運(yùn)用免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)Bad基因表達(dá)與定位的研究結(jié)果表明：Bad在小尾寒羊和薩?？搜蛏诚到y(tǒng)中的表達(dá)具有一定的規(guī)律，呈部位依賴性和周期依賴性的特點(diǎn)。Bad在這兩種綿羊生殖器官中的表達(dá)規(guī)律大體相似： 1．原始卵泡、初級(jí)卵泡與次級(jí)卵泡中卵母細(xì)胞的平均光密度顯著高于三級(jí)卵泡卵母細(xì)胞（P

4、<0.01）； 2．次級(jí)卵泡卵泡上皮細(xì)胞Bad陽(yáng)性細(xì)胞率和平均光密度均顯著高于原始卵泡和初級(jí)卵泡卵泡上皮細(xì)胞（P<0.01）； 3．后期黃體細(xì)胞Bad陽(yáng)性細(xì)胞率和平均光密度均顯著高于初期黃體（P<0.01）； 4．黃體期Bad在輸卵管上皮細(xì)胞表達(dá)的陽(yáng)性細(xì)胞率和平均光密度均顯著強(qiáng)于卵泡期（P<0.01）； 5．黃體期Bad在子宮內(nèi)膜腺體表達(dá)的平均光密度顯著高于卵泡期（P<0.01）； 6．黃體期Ba

5、d在子宮內(nèi)膜基質(zhì)中的表達(dá)的平均光密度和陽(yáng)性細(xì)胞率均顯著高于卵泡期（P<0.01）。 Bad在這兩種綿羊生殖器官中的表達(dá)也存在一些明顯的差異： 1．薩?？搜蛉?jí)卵泡顆粒細(xì)胞的Bad陽(yáng)性細(xì)胞率顯著高于小尾寒羊（P<0.01）； 2．薩?？搜蛉?jí)卵泡和成熟卵泡膜細(xì)胞Bad陽(yáng)性細(xì)胞率和平均光密度均顯著高于小尾寒羊（P<0.01）； 3．Bad在兩品種羊輸卵管表達(dá)的平均光密度存在顯著差異（P<0.01），但無規(guī)律可