銅綠假單胞菌NY3及其突變株好氧降解四溴雙酚A的特性研究.pdf

1、西安建筑科技大學(xué)碩士學(xué)位論文銅綠假單胞菌NY3及其突變株好氧降解四溴雙酚A的特性研究專業(yè)：環(huán)境科學(xué)與工程碩士生：齊慧霞指導(dǎo)老師：聶麥茜教授摘要四溴雙酚A（TBBPA）是一種被廣泛應(yīng)用于各種塑料制品的阻燃劑，其具有較強的生物毒性，造成了嚴(yán)重的環(huán)境污染。盡管已報道多種降解含溴阻燃劑的微生物，而銅綠假單胞菌NY3是最有潛力的解決該類污染物的微生物。利用前期研究構(gòu)建的NY3菌烷氧化酶（alkB）突變株，本論文揭示烷氧化酶基因在該菌細(xì)胞中的作用，

2、并優(yōu)化菌株降解TBBPA的條件，對于利用該菌株修復(fù)污染環(huán)境具有現(xiàn)實和理論意義。本論文以銅綠假單胞菌NY3及其敲除烷氧化酶基因alkB1和alkB2的突變株NB1D、NB2D和NB12DD作為受試菌株，以TBBPA為降解對象，借助離子色譜、GC、GCMS、紫外光譜及三維熒光等分析方法展開研究工作，獲得以下成果：（1）盡管TBBPA在高濃度下對銅綠假單胞菌NY3及其突變株有一定毒性，但仍均能以TBBPA作為單一碳源生長，NY3菌抗毒性和細(xì)胞

3、生長量均最大，最大凈生長量△OD600nm=0.577，而雙突變株NB12DD菌代謝能力最差。以硫酸銨為氮源、培養(yǎng)液初始pH調(diào)至堿性、加大接種量等均能提高培養(yǎng)液中細(xì)胞生長量，因而也大大提高各菌株的脫溴效率和降解率，可使各菌株最大脫溴率達(dá)到2628%范圍內(nèi)。（2）各菌株細(xì)胞生長量大時（△OD600nm1.3時），相同條件下各菌株代謝效率無明顯差別，但當(dāng)細(xì)胞生長量較小時，野生菌NY3代謝效率一般高于各突變株，且在代謝TBBPA過程中alkB

4、2基因作用較alkB1基因更大。（3）5種受試共存碳源中，乳酸鈉為最佳共存碳源，乳酸鈉共存比葡萄糖、檸檬酸鈉、乙醇、乙酸鈉等碳源共存細(xì)胞生長量可分別提高1.9、3.38、6.97、6.97倍，同時對TBBPA的降解效率和脫溴效率也顯著提高。（4）共存乳酸鈉條件下各菌株代謝體系所積累的中間產(chǎn)物種類多。中間產(chǎn)物結(jié)構(gòu)特征同時被紫外光譜、熒光光譜和質(zhì)譜鑒定所印證。各菌株代謝TBBPA中間產(chǎn)物分三類：直接還原脫溴和脫羥基產(chǎn)物33’5?三溴雙酚A和