不同色氨酸水平對生長期水貂消化代謝、生產(chǎn)性能及空腸組織轉(zhuǎn)錄組學(xué)的影響.pdf

1、本論文以色氨酸為試驗材料，以白水貂為研究對象，采用飼養(yǎng)試驗、消化代謝試驗、屠宰試驗、分子生物學(xué)試驗等研究方法，探索飼糧色氨酸水平對生長期白水貂生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化代謝規(guī)律、血清生化指標(biāo)、免疫因子水平、血清中氨基酸的含量、毛皮品質(zhì)等的影響，確定白水貂飼料中色氨酸的適宜添加量，結(jié)合白水貂空腸轉(zhuǎn)錄組試驗，初步研究色氨酸的調(diào)控機(jī)制，為完善白水貂理想氨基酸模型奠定基礎(chǔ)。
　　試驗一:飼糧色氨酸水平對育成期白水貂生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化率和血

2、清指標(biāo)的影響
　　本試驗采用單因素隨機(jī)試驗設(shè)計，選取120只健康、日齡相近（60d±5d）、體重相近的白水貂，隨機(jī)分成6個組，每組20只，公母各半，單籠飼養(yǎng)。在基礎(chǔ)飼糧蛋白質(zhì)水平為34％的基礎(chǔ)上，負(fù)對照組不添加色氨酸（Ⅰ組），試驗組添加色氨酸量分別為0.1％（Ⅱ組）、0.3％（Ⅲ組）、0.5％（Ⅳ組）、0.7％（Ⅴ組），正對照組的基礎(chǔ)蛋白質(zhì)水平為36％和不添加色氨酸（Ⅵ組）。本試驗預(yù)試期7天，試驗期60天。其試驗結(jié)果如下:

3、　　飼糧色氨酸水平對育成期白水貂采食量、日增重均無顯著差異(P＞0.05)，公貂Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅵ組平均日增重略高于其他各組，母貂Ⅱ組平均日增重略高于其他組。公貂Ⅲ組氮沉積最高，顯著高于Ⅳ組(P＜0.05)，母貂Ⅱ組氮沉積最高。Ⅱ組、Ⅲ組母貂血清生化指標(biāo)膽固醇、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶顯著或極顯著低于Ⅳ組(P＜0.01或P＜0.05)。Ⅲ組公貂IgM水平極顯著高于其他各組(P＜0.01)，Ⅰ組、Ⅱ組IgA、IgG水平極顯著高于Ⅴ組、Ⅵ組(P＜

4、0.01)。Ⅱ組母貂IgG極顯著高于Ⅲ組(P＜0.01)，Ⅱ組、Ⅲ組IgM水平極顯著高于Ⅳ組、Ⅵ組(P＜0.01)。
　　小結(jié):(1)對于生長性能和蛋白質(zhì)、脂肪、干物質(zhì)消化率等的影響結(jié)果表明，育成期公貂飼糧色氨酸添加水平為0.3％（飼糧色氨酸水平0.52％）時比較理想，母貂飼糧色氨酸添加水平為0.1％（飼糧色氨酸水平0.32％）可以獲得最好的生長性能。(2)對于氨基酸消化率的影響結(jié)果表明，育成期公母貂飼糧色氨酸添加水平為0.1％（

5、飼糧色氨酸水平0.32％）可以獲得最好的氨基酸沉積。(3)對于血清生化指標(biāo)的影響結(jié)果表明，育成期公母飼糧色氨酸添加水平達(dá)到0.5％（飼糧色氨酸水平0.72％）時，對其肝臟功能造成損傷，導(dǎo)致膽固醇、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶水平顯著升高，并且影響水貂免疫功能。育成期水貂飼糧中色氨酸適宜水平為0.32％～0.52％。
　　試驗二:飼糧色氨酸水平對冬毛期白水貂生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化率、血清指標(biāo)和毛皮品質(zhì)的影響
　　選取體重相近、日齡相

6、近(120d±5d)的試驗白水貂120只，試驗設(shè)計同試驗一，預(yù)試期5d，正試期70d。試驗結(jié)果表明:
　?、窠M公貂血清IGF-1含量最高，Ⅰ組母貂血清IGF-1含量極顯著高于其他組(P＜0.01)，各組平均日增重和平均日采食量差異不顯著（P＞0.05），公貂隨著飼糧色氨酸添加量的增多，平均日采食量有下降的趨勢;母貂Ⅱ組氮沉積最高。公貂高蛋白組各氨基酸消化率最高，除半胱氨酸、色氨酸外，Ⅵ組氨基酸消化率極顯著高于其他各組(P＜0.01

7、)，Ⅰ組半胱氨酸和色氨酸消化率與Ⅵ組無顯著差異(P＞0.05)，母貂高蛋白組各氨基酸消化率也是最高。Ⅱ組公貂谷丙轉(zhuǎn)氨酶最低，膽固醇水平Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組極顯著低于Ⅵ組(P＜0.01)，母貂Ⅰ組、Ⅵ組甘油三酯水平顯著低于Ⅱ組(P＜0.05)，血清谷草轉(zhuǎn)氨酶含量Ⅳ組顯著高于Ⅵ組(P＜0.05)。公貂Ⅳ組免疫指標(biāo)和免疫器官指數(shù)均達(dá)到最高，母貂IgA水平Ⅰ組顯著高于Ⅱ組、Ⅳ組、Ⅴ組(P＜0.05)，IgG、IgM及免疫器官指數(shù)Ⅲ組、Ⅳ組最高。比較

8、各組冬毛期毛皮品質(zhì)，Ⅱ組綜合品質(zhì)最好。
　　小結(jié):飼糧色氨酸水平達(dá)到0.26％時，可以滿足冬毛期白水貂色氨酸營養(yǎng)的基本需要，獲得較理想的生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化率，冬毛期飼糧色氨酸水平在0.26％～0.36％比較適宜。飼糧色氨酸水平達(dá)到0.76％時，氨基酸代謝失去平衡，肝臟受到損傷。
　　試驗三:飼喂不同色氨酸水平飼糧冬毛期公貂空腸組織的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究
　　給白水貂飼喂不同水平色氨酸飼糧，在冬毛期結(jié)束后，Ⅰ組～Ⅴ組每組選取

9、5只公貂進(jìn)行屠宰試驗獲得空腸組織，對空腸組織進(jìn)行RNA提取、測序及序列組裝，獲得Unigene組裝總數(shù)97332條，總長度124017345nt，首次建立白水貂空腸組織轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫。
　　通過與NR、Swiss-Prot、GO、COG、KOG、eggNOG4.5、KEGG數(shù)據(jù)庫比對獲得Unigene注釋，飼糧添加色氨酸試驗組（Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組）注釋的Unigene分別與無添加色氨酸組（Ⅰ組）進(jìn)行比較。Ⅰ組與Ⅱ組比較，共獲得6

10、5個差異基因，Ⅰ組與Ⅲ組比較，共獲得122個差異基因，Ⅰ組與Ⅳ組比較，共獲得132個差異基因，Ⅰ組與Ⅴ組比較，共獲得55個差異基因。由此發(fā)現(xiàn)，Ⅳ組與對照組比較差異基因最多，與試驗二相結(jié)合，Ⅳ組色氨酸含量過高對空腸組織基因組產(chǎn)生影響。
　　在GO分類下差異基因比對，三大功能分類中免疫系統(tǒng)過程、繁殖過程、生長功能、信號功能、生物附著、胞外區(qū)域及受體活動功能等存在較大差異，從以上功能分類中篩選，總共找到9條相關(guān)基因，分別為HSPA8(H