自發(fā)性高血壓和正常血壓大鼠腦動(dòng)脈縫隙連接的表達(dá)和功能差異.pdf

1、目的：觀察自發(fā)性高血壓大鼠（spontaneously hypertensive rat，SHR）和正常血壓Wistar大鼠腦動(dòng)脈細(xì)胞間縫隙連接通道功能和連接蛋白（connexin，Cx）表達(dá)的變化，進(jìn)而探討腦動(dòng)脈中縫隙連接的功能和表達(dá)與高血壓發(fā)病的相關(guān)性。
　　方法：應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗觀察SHR和正常血壓Wistar大鼠腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞間縫隙連接通訊功能的變化；應(yīng)用RT-PCR和Werstern blot技術(shù)比較SHR和正常血壓W

2、istar大鼠腦動(dòng)脈中Cx37、Cx40、Cx43和Cx45的mRNA和蛋白表達(dá)差異；采用透射電鏡技術(shù)比較SHR和正常血壓Wistar大鼠腦動(dòng)脈縫隙連接的形態(tài)學(xué)改變。
　　結(jié)果：（1）全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)結(jié)果顯示SHR腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞膜電容和膜電導(dǎo)都顯著高于正常血壓Wistar大鼠（P<0.05），提示SHR腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞間縫隙連接通訊能力增強(qiáng)。
　　（2）RT-PCR檢測(cè)SHR和正常血壓Wistar大鼠腦動(dòng)脈Cx37、Cx4

3、0、Cx43和Cx45 mRNA的表達(dá)。與正常血壓大鼠相比，SHR腦動(dòng)脈Cx37和Cx40 mRNA的表達(dá)顯著下調(diào)（P<0.01)；Cx43 mRNA的表達(dá)與正常血壓大鼠相比，無(wú)顯著差異（P>0.05）；此外，SHR腦動(dòng)脈Cx45 mRNA的表達(dá)較正常血壓大鼠顯著升高（P<0.01）。
　?。?）Western blot檢測(cè)SHR和正常血壓Wistar大鼠腦動(dòng)脈中Cx蛋白表達(dá)，結(jié)果顯示出與轉(zhuǎn)錄水平相一致的結(jié)果，即：與正常血壓大鼠相

4、比，SHR腦動(dòng)脈Cx37和Cx40蛋白的表達(dá)明顯降低（P<0.05）；SHR腦動(dòng)脈Cx43蛋白表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），但Cx43的磷酸化水平顯著高于正常血壓大鼠（P<0.01）；SHR腦動(dòng)脈Cx45的表達(dá)水平顯著高于正常血壓大鼠（P<0.01）。
　?。?）透射電鏡檢測(cè)SHR和正常血壓Wistar大鼠腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞間縫隙連接的數(shù)量發(fā)現(xiàn)，與正常血壓大鼠比較，SHR腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞間縫隙連接的數(shù)量顯著升高。
　　結(jié)論