阿托伐他汀對脂多糖誘導(dǎo)小鼠胰島β細(xì)胞活力與胰島素分泌的影響.pdf

1、目的：研究阿托伐他?。ˋtorvastatin，ATV）對脂多糖（lipopolysacchar-ide，LPS）刺激后的小鼠胰島β細(xì)胞(Min6)活力、胰島素分泌、細(xì)胞凋亡、Toll樣受體4(TLR4)、核轉(zhuǎn)錄因子(NF-κB)表達(dá)變化及可能機(jī)制。
　　方法：Min6細(xì)胞為材料，實(shí)驗(yàn)分為對照組，DMSO（溶劑）組，LPS組(1mg/L)，低、中、高濃度ATV組（0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L），LPS+低、

2、中、高濃度ATV組，共9組。MTT法檢測藥物在6h、12h、24h對細(xì)胞活性的影響。酶聯(lián)免疫吸附測定(Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)檢測低糖(2.8mmol/L)和高糖(16.7mmol/L)刺激后Min6細(xì)胞胰島素分泌，計(jì)算胰島素分泌指數(shù)(Insulin Secretion Index)，免疫熒光、流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡，WesternBlot檢測Min6細(xì)胞TLR4、NF-κB蛋白表

3、達(dá)水平。
　　結(jié)果：⑴MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:DMSO和低、中、高濃度ATV不影響Min6細(xì)胞活力。LPS時(shí)間依賴性降低Min6細(xì)胞活力(P＜0.01)，ATV時(shí)間濃度依賴性逆轉(zhuǎn)LPS導(dǎo)致的Min6細(xì)胞活力下降(r=0.934，P＜0.01)。⑵ELISA檢測胰島素分泌實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:DMSO和低、中、高濃度ATV不影響Min6細(xì)胞胰島素分泌水平和胰島素釋放指數(shù)。LPS降低Min6細(xì)胞胰島素分泌水平和胰島素釋放指數(shù)(P＜0.01)。高濃

4、度ATV可逆轉(zhuǎn)LPS導(dǎo)致的胰島素分泌水平下降(P＜0.01），但不改善胰島素釋放指數(shù)。⑶免疫熒光/流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:DMSO和低、中、高濃度ATV不影響Min6細(xì)胞凋亡，LPS增加Min6細(xì)胞凋亡(P＜0.05)，ATV可濃度依賴性逆轉(zhuǎn)LPS導(dǎo)致的Min6細(xì)胞凋亡(r=-0.830，P＜0.05)。⑷Western Blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:DMSO和低、中、高濃度ATV不影響Min6細(xì)胞TLR4、NF-κB蛋白表達(dá)，LPS刺激導(dǎo)致M

5、in6細(xì)胞TLR4、NF-κB蛋白表達(dá)上調(diào)(P＜0.01)，ATV可濃度依賴性逆轉(zhuǎn)LPS導(dǎo)致的TLR4、NF-κB蛋白水平增高TLR4:r=-0.905,P＜0.01; NF-κB: r=-0.824,P＜0.01)
　　結(jié)論：①阿托伐他汀不影響正常Min6細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡、胰島素分泌水平。②阿托伐他汀濃度依賴性改善LPS刺激后的Min6細(xì)胞活力，胰島素分泌水平，減少細(xì)胞凋亡。③阿托伐他汀對Min6細(xì)胞的保護(hù)作用與TLR4/NF