原發(fā)性青光眼患者外周血HSP27抗體與雌二醇的表達(dá)及其相關(guān)性研究.pdf

1、目的:
　　青光眼(glaucoma)是目前世界范圍內(nèi)不可逆性致盲眼病，其中原發(fā)性青光眼病因機(jī)制尚未明確，其視野缺損及最終視力喪失的病理學(xué)核心為視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinal ganglion cells，RGCs)的凋亡。抑制RGCs的凋亡，探尋其凋亡的機(jī)制成為青光眼研究的熱點(diǎn)。目前研究發(fā)現(xiàn)，熱休克蛋白27(heat shock protein27，HSP27)在大鼠青光眼模型的RGCs中高度表達(dá)，并在外周血中顯現(xiàn)其相應(yīng)抗體的

2、高表達(dá)狀態(tài)，在原發(fā)性青光眼患者外周血中也發(fā)現(xiàn)該現(xiàn)象。此外，激活雌激素受體(ER-β)可提高內(nèi)源性HSP27含量。原發(fā)性青光眼患者外周血中HSP27抗體及雌激素的表達(dá)狀態(tài)是否具備特異性，兩者之間是否存在一定的相關(guān)性及劑量反應(yīng)關(guān)系，目前尚未見報(bào)道。本研究試圖通過檢測原發(fā)性青光眼患者外周血血清中HSP27抗體與雌二醇(Estradiol，E2)水平及兩者的相關(guān)性，探討其對(duì)原發(fā)性青光眼發(fā)病機(jī)制的影響及視神經(jīng)的保護(hù)作用，為臨床診斷及治療提供新的思

3、路。
　　方法:
　　1.收集自2016年12月-2017年12月就診于大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院眼科病房，經(jīng)眼科系統(tǒng)檢查確診為原發(fā)性青光眼患者為實(shí)驗(yàn)組，同期入院年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者為對(duì)照組。保證入組患者均無重大全身系統(tǒng)性疾病及惡性腫瘤，患者知情同意。
　　2.制備血清及保存:取患者清晨空腹外周靜脈血5ml為樣本，離心后留取上清液1ml至離心管，-80℃凍存。
　　3.HSP27抗體含量檢測:應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(

4、ELISA)測得光密度值（OD值），經(jīng)與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比后計(jì)算HSP27抗體含量，以μg/ml為單位。
　　4.雌二醇(E2)含量檢測:應(yīng)用直接化學(xué)發(fā)光法，檢測相對(duì)光單位(RLU)，以RLU與患者樣本中的E2存在反比關(guān)系為基礎(chǔ)，計(jì)算得患者E2值，以ng/L為單位。
　　5.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS24.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示。實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組及各亞組HSP27抗體、E2含量數(shù)據(jù)，分別應(yīng)用配對(duì)t檢

5、驗(yàn)進(jìn)行比較分析，應(yīng)用pearson相關(guān)分析進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果:
　　1.HSP27抗體含量(μg/ml)比較
　　(1)原發(fā)性青光眼及白內(nèi)障患者血清中HSP27抗體含量分別為2.3315±0.02556μg/ml和39.59±3.63μg/ml,t值為0.012(t＜0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;
　　(2)原發(fā)性開角型及閉角型青光眼患者，血清中HSP27抗體含量分別為2.30528±0.03011μg

6、/ml和2.33070±0.0465μg/ml，t值為0.075(t＞0.05)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;原發(fā)性青光眼患者血清中HSP27抗體明顯高于白內(nèi)障患者，但兩種類型青光眼患者之間無明顯差異。
　　2.雌二醇(E2)含量(ng/L)比較
　　(1)實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組血清中E2男性患者含量分別為39.99±4.98ng/L和43.41±6.65ng/L，t值為0.027(t＜0.05)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;女性患者分別為21.88±

7、3.59ng/L、24.10±3.50ng/L，t值為0.022(t＜0.05)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;實(shí)驗(yàn)組血清中E2含量明顯低于對(duì)照組。
　　(2)原發(fā)性開角型及閉角型青光眼血清中E2含量男性患者分別為38.41±5.34ng/L和39.59±3.63ng/L，t值為0.170(t＞0.05)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;女性患者分別為21.92±4.24ng/L和21.86±3.19ng/Lng/L，t值為0.082(t＞0.05)，差異

8、無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;兩種類型原發(fā)性青光眼患者間E2含量無明顯差異。
　　3.HSP27抗體與E2含量相關(guān)性分析
　　(1)原發(fā)性青光眼女性及男性患者血清中HSP27抗體與E2含量相關(guān)性分析P值為分別為0.001和0.004(P＜0.05)，有相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)r值分別為0.625和0.570;原發(fā)性青光眼患者血清中HSP27抗體與E2含量呈正相關(guān)。
　　(2)白內(nèi)障女性及男性患者血清中HSP27抗體與E2含量相關(guān)性分析P值分別

9、為0.092和0.085(P＞0.05)，無相關(guān)性;白內(nèi)障患者血清中HSP27抗體與E2含量無相關(guān)性。
　　4.視野缺損程度與HSP27抗體含量相關(guān)性分析，輕、中、重度視野缺損P值分別為0.088、0.075、0.103(P＞0.05)，無相關(guān)性;視野缺損程度與HSP27抗體含量無相關(guān)性。
　　結(jié)論:
　　1.原發(fā)性青光眼患者血清中HSP27抗體高表達(dá)，HSP27抗體的產(chǎn)生可能參與并加速RGCS的凋亡。其穩(wěn)定高表達(dá)狀態(tài)