櫻桃生物有機肥的研制及其生物效應.pdf

1、本文為給櫻桃[Cerasus pseudocerasus(Lindl.)G.Don]生物有機肥料開發(fā)提供優(yōu)良的菌株資源，通過保綠法和蘿卜子葉增重法，結合定量檢測細菌分離物產植物激素的能力，從櫻桃根際土壤中篩選具有良好應用潛力的細菌分離物。利用盆栽試驗驗證其促生效果，獲得了一株促生效果較好的細菌分離物YT3。通過進行形態(tài)學觀察、生理生化測定、16S rRNA基因序列及系統(tǒng)發(fā)育分析將其初步鑒定為假單胞菌屬（Pseudomonas sp.）。

2、
　　 以草炭為對照，研究了發(fā)酵雞糞、蚯蚓糞和菇渣作為YT3吸附載體的可行性。結果表明:雞糞吸水率最低，有效菌體釋放效率為93.08％;菇渣的吸水性最高，但其菌體釋放效率僅為67.59％;菌體釋放效率與載體的陽離子代換量呈極顯著的負相關。隨著YT3接種時間的增加，雞糞、蚯蚓糞和草炭處理中的活菌數均有一個明顯的增加過程;在接種至第30d時，三種有機物料中的最大活菌數分別為8.9×108、7.5×108和5.9×108CFU/g，分

3、別為初始接種量的560％、326％和187％;在第180d時，有效活菌數開始小于初始接種值。隨著接種時間的延長，菇渣處理的有效活菌數呈一直下降趨勢。用浸提液培養(yǎng)苜蓿種子36h后，雞糞、蚯蚓糞和草炭處理的種子發(fā)芽指數均在80％以上，初步認定肥料浸提液對植物無毒。雞糞和蚯蚓糞，尤其是雞糞是適宜的YT3吸附載體。
　　 通過單因子試驗探討了YT3的搖瓶培養(yǎng)條件，確定最佳培養(yǎng)條件為培養(yǎng)基溫度34℃，初始pH值6.5，搖床轉速180rpm

4、，接種量10％。YT3的生長曲線符合Logistic生長回歸模型，培養(yǎng)3-12h為菌株對數期，YT3的適宜種齡為12h;在培養(yǎng)至第7h時，菌株數量增長最快。通過單因素和正交試驗對YT3液體發(fā)酵培養(yǎng)及組成進行了優(yōu)化，結果認為影響YT3生長的因素順序由強到弱為蛋白胨、乳糖、MgSO4、K2HPO4，優(yōu)化后的培養(yǎng)基配方為(W/V):乳糖2％，蛋白胨2.00％，K2HPO40.15％，MgSO4·7H2O0.02％，CaCl20.01％。

5、>　　 采用綠色熒光蛋白基因標記技術對YT3進行了標記，獲得了標記菌YT3(G)。質粒穩(wěn)定性試驗表明，含gfp標記基因的質粒在YT3中可以穩(wěn)定遺傳，在無選擇性壓力下質粒丟失率很低，可用于在盆栽試驗中檢測YT3(G)的定殖能力。盆栽試驗結果表明，在長達120d時間內YT3(G)能夠穩(wěn)定定殖于櫻桃根際。
　　 以一年生‘吉塞拉’櫻桃苗為試材，通過盆栽試驗，研究了有機肥(OF)和生物有機肥(BF)對櫻桃根際細菌群落結構多樣性、土壤酶

6、活性、櫻桃生長及養(yǎng)分吸收的影響。結果表明:同對照相比，OF和BF的施用可提高根際土壤細菌群落結構的多樣性及豐富度。同對照相比，OF提高了土壤脲酶、蔗糖酶活性。同OF相比，BF處理的脲酶、磷酸酶、蔗糖酶和多酚氧化酶活性顯著提高。OF的施用可促進櫻桃根系的生長，提高N和P的養(yǎng)分吸收量。同OF處理相比，BF處理根、莖和葉的生物量分別增加9.55％，9.98％和11.16％，N、P和K養(yǎng)分吸收量分別提高15.35％，21.06％和32.09％。