櫻桃生物有機(jī)肥的研制及其生物效應(yīng).pdf

1、本文為給櫻桃[Cerasus pseudocerasus(Lindl.)G.Don]生物有機(jī)肥料開發(fā)提供優(yōu)良的菌株資源，通過保綠法和蘿卜子葉增重法，結(jié)合定量檢測(cè)細(xì)菌分離物產(chǎn)植物激素的能力，從櫻桃根際土壤中篩選具有良好應(yīng)用潛力的細(xì)菌分離物。利用盆栽試驗(yàn)驗(yàn)證其促生效果，獲得了一株促生效果較好的細(xì)菌分離物YT3。通過進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察、生理生化測(cè)定、16S rRNA基因序列及系統(tǒng)發(fā)育分析將其初步鑒定為假單胞菌屬（Pseudomonas sp.）。

2、
　　 以草炭為對(duì)照，研究了發(fā)酵雞糞、蚯蚓糞和菇渣作為YT3吸附載體的可行性。結(jié)果表明:雞糞吸水率最低，有效菌體釋放效率為93.08％;菇渣的吸水性最高，但其菌體釋放效率僅為67.59％;菌體釋放效率與載體的陽離子代換量呈極顯著的負(fù)相關(guān)。隨著YT3接種時(shí)間的增加，雞糞、蚯蚓糞和草炭處理中的活菌數(shù)均有一個(gè)明顯的增加過程;在接種至第30d時(shí)，三種有機(jī)物料中的最大活菌數(shù)分別為8.9×108、7.5×108和5.9×108CFU/g，分

3、別為初始接種量的560％、326％和187％;在第180d時(shí)，有效活菌數(shù)開始小于初始接種值。隨著接種時(shí)間的延長(zhǎng)，菇渣處理的有效活菌數(shù)呈一直下降趨勢(shì)。用浸提液培養(yǎng)苜蓿種子36h后，雞糞、蚯蚓糞和草炭處理的種子發(fā)芽指數(shù)均在80％以上，初步認(rèn)定肥料浸提液對(duì)植物無毒。雞糞和蚯蚓糞，尤其是雞糞是適宜的YT3吸附載體。
　　 通過單因子試驗(yàn)探討了YT3的搖瓶培養(yǎng)條件，確定最佳培養(yǎng)條件為培養(yǎng)基溫度34℃，初始pH值6.5，搖床轉(zhuǎn)速180rpm

4、，接種量10％。YT3的生長(zhǎng)曲線符合Logistic生長(zhǎng)回歸模型，培養(yǎng)3-12h為菌株對(duì)數(shù)期，YT3的適宜種齡為12h;在培養(yǎng)至第7h時(shí)，菌株數(shù)量增長(zhǎng)最快。通過單因素和正交試驗(yàn)對(duì)YT3液體發(fā)酵培養(yǎng)及組成進(jìn)行了優(yōu)化，結(jié)果認(rèn)為影響YT3生長(zhǎng)的因素順序由強(qiáng)到弱為蛋白胨、乳糖、MgSO4、K2HPO4，優(yōu)化后的培養(yǎng)基配方為(W/V):乳糖2％，蛋白胨2.00％，K2HPO40.15％，MgSO4·7H2O0.02％，CaCl20.01％。

5、>　　 采用綠色熒光蛋白基因標(biāo)記技術(shù)對(duì)YT3進(jìn)行了標(biāo)記，獲得了標(biāo)記菌YT3(G)。質(zhì)粒穩(wěn)定性試驗(yàn)表明，含gfp標(biāo)記基因的質(zhì)粒在YT3中可以穩(wěn)定遺傳，在無選擇性壓力下質(zhì)粒丟失率很低，可用于在盆栽試驗(yàn)中檢測(cè)YT3(G)的定殖能力。盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明，在長(zhǎng)達(dá)120d時(shí)間內(nèi)YT3(G)能夠穩(wěn)定定殖于櫻桃根際。
　　 以一年生‘吉塞拉’櫻桃苗為試材，通過盆栽試驗(yàn)，研究了有機(jī)肥(OF)和生物有機(jī)肥(BF)對(duì)櫻桃根際細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)多樣性、土壤酶

6、活性、櫻桃生長(zhǎng)及養(yǎng)分吸收的影響。結(jié)果表明:同對(duì)照相比，OF和BF的施用可提高根際土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的多樣性及豐富度。同對(duì)照相比，OF提高了土壤脲酶、蔗糖酶活性。同OF相比，BF處理的脲酶、磷酸酶、蔗糖酶和多酚氧化酶活性顯著提高。OF的施用可促進(jìn)櫻桃根系的生長(zhǎng)，提高N和P的養(yǎng)分吸收量。同OF處理相比，BF處理根、莖和葉的生物量分別增加9.55％，9.98％和11.16％，N、P和K養(yǎng)分吸收量分別提高15.35％，21.06％和32.09％。