組胺對(duì)黑褐新糠蝦和中華絨螯蟹生長(zhǎng)發(fā)育及部分免疫機(jī)能的影響.pdf

1、糠蝦類(lèi)是一種對(duì)環(huán)境污染物比較敏感的毒性試驗(yàn)生物，在沿海水域生態(tài)系統(tǒng)中占有重要的位置，在我國(guó)沿海黑褐新糠蝦(Neomysisawatschensis)和日本新糠蝦(Neomysisjaponica)分布比較廣泛。中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)隸屬于十足目(Decapoda)、爬行亞目(Reptantia)、方蟹科(Grapsidae)、絨螯蟹屬(Eriocheir)，俗稱(chēng)河蟹、大閘蟹，是我國(guó)重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物之一。近幾年

2、來(lái)，隨著人們對(duì)水產(chǎn)品的消費(fèi)需求不斷增長(zhǎng)，我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的規(guī)模不斷擴(kuò)大，而野雜魚(yú)也被越來(lái)越多的應(yīng)用于飼料行業(yè)。若野雜魚(yú)或飼料中的魚(yú)粉原料儲(chǔ)存不當(dāng)會(huì)腐敗產(chǎn)生大量生物胺，可能會(huì)危害水域生態(tài)系統(tǒng)以及水產(chǎn)動(dòng)物的健康。組胺是生物胺的一種，目前有關(guān)其對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的影響還沒(méi)有明確的看法，對(duì)其影響機(jī)理也未見(jiàn)有報(bào)道。因此，本實(shí)驗(yàn)以黑褐新糠蝦和中華絨螯蟹作為試驗(yàn)對(duì)象，從胚胎發(fā)育、幼體生長(zhǎng)和成體養(yǎng)殖三個(gè)視角，探究組胺對(duì)黑褐新糠蝦胚胎發(fā)育、中華絨螯蟹仔蟹生長(zhǎng)、發(fā)育

3、和中華絨螯蟹成體部分免疫指標(biāo)可能產(chǎn)生的影響，期望能以糠蝦作為模式生物來(lái)監(jiān)測(cè)生物胺的毒性，并以組胺對(duì)中華絨螯蟹生長(zhǎng)、發(fā)育及部分免疫指標(biāo)影響的結(jié)果作為指導(dǎo)實(shí)際養(yǎng)殖生產(chǎn)的理論資料。
　　 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)黑褐新糠蝦胚胎采用組胺藥浴，觀察胚胎各期的變態(tài)率、持續(xù)時(shí)間以及孵化率；對(duì)中華絨螯蟹仔蟹飼喂添加不同濃度的組胺飼料，分析了相關(guān)的生長(zhǎng)指標(biāo)(死亡率、增重率及蛻殼情況等)，采用高效液相色譜法(HPIC)檢測(cè)了組胺在仔蟹體內(nèi)積累情況及其與其它生物

4、胺的關(guān)系，為從營(yíng)養(yǎng)生理學(xué)的角度入手初步探索組胺對(duì)中華絨螯蟹仔蟹生長(zhǎng)和發(fā)育的影響機(jī)理提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)；對(duì)中華絨螯蟹成體飼喂配合飼料和不同高溫儲(chǔ)存時(shí)間的野雜魚(yú)，測(cè)定了存活率、肝胰腺指數(shù)(HSI)及部分免疫學(xué)指標(biāo)，比較分析了配合飼料和不同高溫儲(chǔ)存時(shí)間的野雜魚(yú)對(duì)中華絨螯蟹的影響，為生產(chǎn)實(shí)踐提供理論資料。研究結(jié)果如下：
　　 1.組胺對(duì)黑褐新糠蝦胚胎發(fā)育的影響
　　 本實(shí)驗(yàn)以黑褐新糠蝦為研究對(duì)象，取初始階段為無(wú)節(jié)幼體的胚胎，浸泡于組胺

5、濃度為0(對(duì)照)，5，10和15mg/L的培養(yǎng)液中，對(duì)無(wú)節(jié)幼體期、后無(wú)節(jié)幼體期和眼柄期的變態(tài)率、各期持續(xù)時(shí)間和孵化率進(jìn)行測(cè)定分析，結(jié)果如下：
　　 1)組胺對(duì)黑褐新糠蝦胚胎從無(wú)節(jié)幼體期至眼柄期的變態(tài)率沒(méi)有影響，但可以降低眼柄期至糠蝦幼體的變態(tài)率；
　　 2)組胺延長(zhǎng)了后無(wú)節(jié)幼體期和眼柄期的發(fā)育時(shí)間，分別延長(zhǎng)了約8h和6h，
　　 3)組胺降低了黑褐新糠蝦胚胎的孵化率。
　　 以上結(jié)果說(shuō)明組胺對(duì)黑褐新糠蝦胚

6、胎發(fā)育有一定影響，且隨著浸浴時(shí)間延長(zhǎng)影響較為顯著。
　　 2.飼料中添加組胺對(duì)中華絨螯蟹仔蟹生長(zhǎng)及體內(nèi)胺類(lèi)物質(zhì)水平的影響
　　 本實(shí)驗(yàn)以中華絨螯蟹仔蟹為研究對(duì)象，飼喂組胺添加濃度分別為0(對(duì)照)、1000、2000和4000mg/Kg的飼料，測(cè)定組胺對(duì)仔蟹生長(zhǎng)、死亡和體內(nèi)生物胺含量的影響，結(jié)果如下：
　　 1)飼料中添加的組胺對(duì)中華絨螯蟹仔蟹的增重率、特定生長(zhǎng)率、飼料系數(shù)和死亡率沒(méi)有影響；
　　 2.)中

7、華絨螯蟹仔蟹體內(nèi)組胺含量隨著飼料中組胺含量的升高而增加，而亞精胺的含量則隨著飼料中組胺含量的升高而有降低趨勢(shì)，說(shuō)明外源性組胺可以在飼養(yǎng)動(dòng)物體內(nèi)蓄積，且可能對(duì)其它生物胺含量存在影響。
　　 3.飼料中添加組胺對(duì)中華絨螯蟹仔蟹生長(zhǎng)蛻殼及體內(nèi)消化酶活性的影響
　　 本實(shí)驗(yàn)以中華絨螯蟹仔蟹為研究對(duì)象，飼喂組胺添加濃度分別為0(對(duì)照)、1000、2000和4000mg/Kg的飼料，測(cè)定組胺對(duì)仔蟹蛻殼和消化酶的影響，結(jié)果如下：

8、>　　 1)組胺對(duì)中華絨螯蟹仔蟹Ⅲ期至仔蟹Ⅳ期的蛻殼率、仔蟹Ⅳ期至仔蟹Ⅴ期的蛻殼率和仔蟹Ⅲ期至仔蟹Ⅳ期的蛻殼間期都沒(méi)有影響；
　　 2)飼料中的組胺對(duì)中華絨螯蟹仔蟹的胃蛋白酶、類(lèi)胰蛋白酶和淀粉酶的活性有抑制作用，當(dāng)飼料中組胺濃度大于1000mg/Kg時(shí)胃蛋白酶和類(lèi)胰蛋白酶的活性會(huì)顯著降低(P<0.05)，當(dāng)飼料中組胺濃度大于2000mg/Kg時(shí)淀粉酶活性要顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。其中1000mg/Kg組的纖維素酶活性顯

9、著高于對(duì)照組(P<0.05)，而脂肪酶的活性不受飼料中組胺的影響。
　　 4.野雜魚(yú)和配合飼料對(duì)中華絨螯蟹存活及部分免疫指標(biāo)的影響
　　 1)本實(shí)驗(yàn)投喂配合飼料和30℃條件下保存不同時(shí)間的野雜魚(yú)(0h，12h和24h)，并運(yùn)用揮發(fā)性鹽基氮(Totalvolatilebasicnitrogen，TVBN)對(duì)保存不同時(shí)間的野雜魚(yú)(0h，12h和24h)進(jìn)行新鮮度等級(jí)評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)揮發(fā)性鹽基氮(TVBN)分別為12.0mg/100

10、g、64.2mg/100g和180.2mg/100g，它們相應(yīng)鮮度分別為一級(jí)即新鮮級(jí)(0h)和大于三級(jí)即為腐敗級(jí)(12h和24h)；而組胺含量由17mg/Kg(0h野雜魚(yú))升至93mg/Kg(24h野雜魚(yú))，組胺、尸胺、腐胺和酪胺的生物胺總量由734mg/Kg升至2300mg/Kg；
　　 2)0h野雜魚(yú)組和配合飼料組之間的存活率無(wú)顯著差異(P>0.05)，且為各餌料組中最高。隨著野雜魚(yú)保存時(shí)間的延長(zhǎng)，中華絨螫蟹的存活率逐漸降低

11、，其中24h野雜魚(yú)組的存活率顯著低于0h野雜魚(yú)組和配合飼料組(P<0.05)。
　　 3)配合飼料組中華絨螯蟹的肝胰腺指數(shù)顯著高于野雜魚(yú)各處理組(P<0.05)，而THC和血藍(lán)蛋白含量差異并不顯著(P>0.05)。
　　 4)24h野雜魚(yú)組的血淋巴總蛋白和血清ACP活性顯著低于其它三組(P<0.05)，其中配合飼料組的ACP活性較高；24h野雜魚(yú)組的AKP活性顯著低于0h野雜魚(yú)組(P<0.05)，而與其它組無(wú)顯著差異(P