雌激素對中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)生長發(fā)育及其體內(nèi)雌激素水平的影響.pdf

1、中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）隸屬于十足目（Decapoda）、爬行亞目（Reptantia）、方蟹科（Grapsidae）、絨螯蟹屬（Eriocheir），俗稱河蟹、大閘蟹。其苗種多分布于東部沿海，以及北起遼河口，南至廣東省。近年來，各地廣泛開展了人工蟹苗的培育和成蟹的養(yǎng)殖，為了增加養(yǎng)殖產(chǎn)量，目前極需了解河蟹的生殖、生長與蛻殼的生理生態(tài)變化的規(guī)律性，而此種動態(tài)的規(guī)律性變化又無不與河蟹分泌的激素調(diào)控密切相關(guān)。而如果通

2、過外源給予雌激素可以調(diào)控河蟹的發(fā)育，那么在生產(chǎn)中無疑是有很大前景的。因此，本實驗給予中華絨螯蟹幼體，成體外源雌激素，統(tǒng)計其生長，發(fā)育各項指標，從而了解外源雌激素的影響效果。這為弄清內(nèi)外源雌激素問關(guān)系及其對甲殼動物性腺發(fā)育的影響提供理論依據(jù)，為中華絨螯蟹性腺發(fā)育激素調(diào)控的研究提供基礎(chǔ)資料，同時也為研究環(huán)境內(nèi)分泌干擾物對甲殼類動物繁殖生存的影響奠定基礎(chǔ)。 本實驗通過對中華絨螯蟹幼體采用17β-雌二醇（17β-estradiol）藥浴

3、，觀察其蛻殼時間，存活率，以及對其生長的影響；對性腺發(fā)育高峰期（9月-11月）中華絨螯蟹外源注射17β-E2；對性早熟中華絨螫蟹外源注射17α-羥基孕酮；以及對實驗的卵巢組織采取免疫組織化學方法，并采用活體解剖觀察、石蠟切片及等手段，系統(tǒng)研究了雌激素對中華絨螫蟹生長，發(fā)育的影響。研究結(jié)果如下： 1．17β-雌二醇對中華絨螯蟹幼體發(fā)育的研究 1）17β-E2可以縮短中華絨螫蟹幼體溞Ⅰ變溞Ⅳ，仔Ⅱ變仔Ⅴ時的變態(tài)時間；

4、 2）17β-E2對中華絨螯蟹幼體外部特征（甲長和甲寬）沒有明顯影響； 3）17β-E2對中華絨螫蟹幼體中17β-E2濃度無影響。 2．外源17β-E2對中華絨螫蟹卵巢發(fā)育和內(nèi)源雌激素水平的影響 1）在卵巢發(fā)育Ⅲ期1-Ⅳ期間，17β-E2有呈劑量依賴性促進中華絨螯蟹卵巢發(fā)育的特點，表現(xiàn)為：性腺指數(shù)增大，卵細胞發(fā)育快，卵細胞直徑增大； 2）中華絨螯蟹血淋巴中17β-E2含量，有隨卵巢發(fā)育逐漸降低的趨勢，尤其

5、在實驗30d后有明顯的下降； 3）對血淋巴和卵巢中17β-E2的含量與性腺指數(shù)進行相關(guān)性分析后發(fā)現(xiàn)：血淋巴和卵巢中17β-E2含量與性腺指數(shù)均呈極顯著負相關(guān)； 4）外源17β-E2能促進卵巢發(fā)育，能明顯增加血淋巴中17β-E2含量，而降低Ⅲ期1卵巢內(nèi)17β-E2含量。 3．中華絨螯蟹不同卵巢發(fā)育階段中雌二醇受體（ER）的免疫識別 1）在中華絨螯蟹雌蟹卵巢發(fā)育高峰期的卵母細胞中存在著雌二醇受體； 2

6、）在卵巢發(fā)育到Ⅲ期1（即三期早期），雌二醇受體主要分布于胞質(zhì)；在卵巢發(fā)育到Ⅲ期2（三期晚期）-Ⅳ期時，雌二醇受體主要分布于核。 4．17α-羥基孕酮對性早熟中華絨螯蟹主要體征和卵巢發(fā)育影響的初步觀察 1）17α-羥基孕酮對性早熟中華絨螯蟹外部特征（甲長和甲寬）沒有明顯影響； 2）較高劑量組10-1mg/g劑量的17α-羥基孕酮能明顯促進性早熟中華絨螯蟹卵巢的早期發(fā)育（15d），卵巢指數(shù)和卵母細胞長徑均比對照組有顯