鹽漬海帶紅腐現(xiàn)象的微生物學本質研究.pdf

1、鹽漬海帶因其加工、儲運、食用方便，深受消費者歡迎，在海藻市場占有較大份額，但在非冷鏈儲運和銷售期間，鹽漬海帶會出現(xiàn)滲出紅色鹵水、腐敗現(xiàn)象，這勢必會影響產品品質，并存在食品安全隱患。本文以基于小分子有機酸鹽的低營養(yǎng)培養(yǎng)技術和宏基因組高通量測序技術為手段，揭示鹽漬海帶常溫貯藏期間微生物的種群組成與群落結構，確定未知菌株分類學地位，并研究了部分菌株產胞外水解酶性質。
　　每2個月取常溫貯藏的成品鹽漬海帶的鹵水樣品(S1～S7)，采用平板

2、分離技術分離培養(yǎng)樣品中的微生物。16S rRNA基因分析結果表明，所分離菌株均為嗜鹽古菌，從S1樣品中分離到80株菌，分屬3個屬的5個分類單元;從S2樣品中分離到87株菌，分屬9個屬的12個分類單元;從S3樣品中分離到76株菌，分屬13個屬的18個分類單元;從S4樣品中分離到80株菌，分屬17個屬的22個分類單元;從S5樣品中分離到63株菌，分屬12個屬的16個分類單元;從S6樣品中分離到79株菌，分屬15個屬的23個分類單元;從S7樣

3、品中分離到86株菌，分屬16個屬的20個分類單元。S1～S6樣品的優(yōu)勢類群均為Halobacterium類群，S7樣品優(yōu)勢類群為Halosimplex類群。常溫貯藏一年的鹽漬海帶中微生物優(yōu)勢類群的優(yōu)勢度逐漸降低，但微生物的多樣性與均勻度升高。
　　通過對鹽漬海帶鹵水S1～S7進行Illumina MiSeq測序，共獲得488294條序列，這些序列歸屬于2391個OTU，分別屬于Euryarchaeota、Nanohaloarcha

4、eota、Thaumarchaeota門下的Halobacteria、Nanohaloarchaea、Nitrososphaeria綱中的28個屬和一些未知類群。鹽漬海帶樣品S1～S7優(yōu)勢類群始終均為Halobacterium類群。常溫貯藏一年的鹽漬海帶中微生物群落結構由簡單到多樣，最后趨于穩(wěn)定。
　　多相分類學研究表明，分離自鹽漬海帶的3個菌株HD8-45、HD8-51和HD8-83分別代表1個新屬和2個新種:Salinibac

5、ulum litoreum gen.nov.，sp.nov.、Halorussuslitoreus sp.nov.和Halorussus salinus sp.nov.。
　　從分離菌株中，選擇21株菌株為代表進行菌株的胞外酶分析，其中有約57％的菌株具不同程度的產胞外蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、褐藻膠酶活性。Haloarchaeobius iranensis HD12-72蛋白酶活力最高，Haloarcula argentinens