鹽漬海帶紅腐現(xiàn)象的微生物學(xué)本質(zhì)研究.pdf

1、鹽漬海帶因其加工、儲(chǔ)運(yùn)、食用方便，深受消費(fèi)者歡迎，在海藻市場(chǎng)占有較大份額，但在非冷鏈儲(chǔ)運(yùn)和銷售期間，鹽漬海帶會(huì)出現(xiàn)滲出紅色鹵水、腐敗現(xiàn)象，這勢(shì)必會(huì)影響產(chǎn)品品質(zhì)，并存在食品安全隱患。本文以基于小分子有機(jī)酸鹽的低營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)技術(shù)和宏基因組高通量測(cè)序技術(shù)為手段，揭示鹽漬海帶常溫貯藏期間微生物的種群組成與群落結(jié)構(gòu)，確定未知菌株分類學(xué)地位，并研究了部分菌株產(chǎn)胞外水解酶性質(zhì)。
　　每2個(gè)月取常溫貯藏的成品鹽漬海帶的鹵水樣品(S1～S7)，采用平板

2、分離技術(shù)分離培養(yǎng)樣品中的微生物。16S rRNA基因分析結(jié)果表明，所分離菌株均為嗜鹽古菌，從S1樣品中分離到80株菌，分屬3個(gè)屬的5個(gè)分類單元;從S2樣品中分離到87株菌，分屬9個(gè)屬的12個(gè)分類單元;從S3樣品中分離到76株菌，分屬13個(gè)屬的18個(gè)分類單元;從S4樣品中分離到80株菌，分屬17個(gè)屬的22個(gè)分類單元;從S5樣品中分離到63株菌，分屬12個(gè)屬的16個(gè)分類單元;從S6樣品中分離到79株菌，分屬15個(gè)屬的23個(gè)分類單元;從S7樣

3、品中分離到86株菌，分屬16個(gè)屬的20個(gè)分類單元。S1～S6樣品的優(yōu)勢(shì)類群均為Halobacterium類群，S7樣品優(yōu)勢(shì)類群為Halosimplex類群。常溫貯藏一年的鹽漬海帶中微生物優(yōu)勢(shì)類群的優(yōu)勢(shì)度逐漸降低，但微生物的多樣性與均勻度升高。
　　通過對(duì)鹽漬海帶鹵水S1～S7進(jìn)行Illumina MiSeq測(cè)序，共獲得488294條序列，這些序列歸屬于2391個(gè)OTU，分別屬于Euryarchaeota、Nanohaloarcha

4、eota、Thaumarchaeota門下的Halobacteria、Nanohaloarchaea、Nitrososphaeria綱中的28個(gè)屬和一些未知類群。鹽漬海帶樣品S1～S7優(yōu)勢(shì)類群始終均為Halobacterium類群。常溫貯藏一年的鹽漬海帶中微生物群落結(jié)構(gòu)由簡(jiǎn)單到多樣，最后趨于穩(wěn)定。
　　多相分類學(xué)研究表明，分離自鹽漬海帶的3個(gè)菌株HD8-45、HD8-51和HD8-83分別代表1個(gè)新屬和2個(gè)新種:Salinibac

5、ulum litoreum gen.nov.，sp.nov.、Halorussuslitoreus sp.nov.和Halorussus salinus sp.nov.。
　　從分離菌株中，選擇21株菌株為代表進(jìn)行菌株的胞外酶分析，其中有約57％的菌株具不同程度的產(chǎn)胞外蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、褐藻膠酶活性。Haloarchaeobius iranensis HD12-72蛋白酶活力最高，Haloarcula argentinens