影響益生菌活性因素的研究.pdf

1、益生菌的活性是衡量含有益生菌的相關產品的質量及貨架期的一個重要標準。如何提高益生菌的活性以獲得高活性的益生菌，一直以來都是困擾著益生菌產品生產者和科技工作者的瓶頸。本課題所選用的益生菌菌種為保加利亞乳桿菌（Lactobacillusbulgaricus，LB),為了獲得高活性的益生菌，從益生菌菌體培養(yǎng)開始著手，通過培養(yǎng)基中所用的碳源、氮源和菌體生長促進因子的選擇、耐熱試驗以及產品保藏條件等研究來為高活性益生菌產品的實現(xiàn)提供一定的理論依據(jù)

2、和技術支持。
　　 首先，篩選出對LB菌體生長有很好促進作用的碳源、氮源和蔬菜浸提液，再組合培養(yǎng)基培養(yǎng)LB菌體并進行擴大培養(yǎng)實驗。其次，選擇出對LB菌體生長促進作用效果最顯著的蔬菜浸提液進行成分分離、提取，再分別組合培養(yǎng)基培養(yǎng)LB菌體，選出效果最佳的蔬菜成分通過高效液相色譜(HPLC)進行鑒定。再次，將在各組添加了對LB菌體生長促進作用較好的蔬菜浸提液的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的LB菌體分離出來，經過懸浮、造粒等處理后分別置于45℃、55℃

3、、65℃、80℃條件下進行熱處理，選出具有較好耐熱能力的LB菌體。最后，將上述實驗中耐熱能力最好的LB菌體與脫脂乳粉混合、造粒、壓片和封裝，分別置于常溫和4℃條件下儲藏并測定LB菌體活菌數(shù)的變化。其結果有:
　　 (1)對LB菌體生長的促進效果最佳的碳和氮源分別為玉米淀粉和蛋白胨。當培養(yǎng)到24h時，在添加有玉米淀粉、蛋白胨的培養(yǎng)液中的LB菌體濃度分別達到7.5×108cfu/ml、2.4×108cfu/ml。48種蔬菜浸提液中有

4、9種對LB菌體的生長有較好的促進作用，它們分別為小白菜、蓮花白、油麥菜、山藥、白蘿卜、胡蘿卜、小青菜、芹菜、黃瓜。當培養(yǎng)到24h時，各組培養(yǎng)液中的LB菌體的濃度分別達到9.0×108cfu/ml、9.1×108cfu/ml、8.0×108cfu/ml、1.2×109cfu/ml、1.0×109cfu/ml、1.4×109cfu/ml、8.1×108cfu/ml、7.1×108cfu/ml和2.8×109cfu/ml，其中添加有黃瓜浸提液

5、的培養(yǎng)基中的LB活菌數(shù)的濃度最大。擴大培養(yǎng)過程中各組培養(yǎng)基中的LB菌體均能長時間保持較高的活性。
　　 (2)黃瓜所含的各組成分中脂溶性成分對LB菌體的生長起著較好的促進作用，其中，類胡蘿卜素作用最為突出。當LB接種到添加有類胡蘿卜素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)到24h時，培養(yǎng)基中的LB菌體濃度達到1.6×108cfu/ml。當用高效液相色譜對類胡蘿卜素的組成進行鑒定時，確定了其中含有β-類胡蘿卜素。
　　 (3)將添加有小白菜、蓮花

6、白等9種蔬菜浸提液的培養(yǎng)基中培養(yǎng)出的LB菌體分離后與分別脫脂乳粉混合、造粒、封裝，置于高溫條件下進行處理。結果顯示，添加有白蘿卜浸提液的培養(yǎng)基中生長的LB菌體表現(xiàn)出最好的耐熱能力;置于45℃、55℃、65℃和80℃條件下處理2h，乳粉顆粒中的LB菌體的活菌數(shù)分別為6.7×109cfu/g、2.3×109cfu/g、1.1×108cfu/g、5.7×106cfu/g。
　　 (4)將于添加白蘿卜浸提液的培養(yǎng)基中生長的LB菌體分離出

7、來，經過與脫脂乳粉混合造粒、壓片、封裝并分別置于常溫和4℃條件下保藏。結果顯示，不管是乳粉顆粒還是奶片最佳的保藏條件都是4℃冷藏。乳粉顆粒中的LB菌體在常溫下放置到120d時活菌數(shù)則低于106cfu/g，而4℃冷藏的乳粉顆粒中的LB活菌數(shù)在放置到180天時活菌數(shù)為3.5×106cfu/g。奶片中的LB菌體在常溫下放置到150d時活菌數(shù)則低于106cfu/g;而4℃條件下保藏的奶片中的LB菌體在放置到180d時，活菌數(shù)則依然高達5.8×1