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文檔簡介
1、目的:本實(shí)驗(yàn)利用Endura TEL ELF3200力學(xué)儀器對新鮮周圍神經(jīng)和經(jīng)不同脫細(xì)胞方法處理的周圍神經(jīng)進(jìn)行生物力學(xué)測試,探討新鮮周圍神經(jīng)和經(jīng)不同脫細(xì)胞方法處理的周圍神經(jīng)在生物力學(xué)性能上的差異,為組織工程化神經(jīng)構(gòu)建和臨床神經(jīng)修復(fù)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:收集24只3月齡雄性Wistar大鼠的雙側(cè)坐骨神經(jīng),共48條,隨機(jī)等分為4組。正常對照組(A組):不經(jīng)任何處理,取出后立即置于PBS中備用;物理凍融組(B組):-196℃冷凍
2、和37℃融解,反復(fù)凍融5次對坐骨神經(jīng)進(jìn)行脫細(xì)胞處理;Sondell方法組(C組):采用Triton X-100和脫氧膽酸鈉對坐骨神經(jīng)進(jìn)行脫細(xì)胞處理;改良化學(xué)方法組(D組):采用TritonX-200、Sulfobetaine-10及Sulfobetaine-16對坐骨神經(jīng)進(jìn)行脫細(xì)胞處理。脫細(xì)胞過程完成后,四組神經(jīng)均經(jīng)HE染色、場發(fā)射掃描電鏡觀察神經(jīng)結(jié)構(gòu),后用Endura TEC ELF3200力學(xué)儀器測試四組神經(jīng)的生物力學(xué)性能。
3、 結(jié)果:HE染色及場發(fā)射掃描電鏡結(jié)果示:改良化學(xué)方法所獲得的脫細(xì)胞神經(jīng)的脫細(xì)胞效果與傳統(tǒng)Sondell法相似并優(yōu)于物理法,而脫髓鞘及組織結(jié)構(gòu)保留的效果也優(yōu)于二者;生物力學(xué)測試結(jié)果示:B組神經(jīng)的極限載荷、極限應(yīng)力、及斷裂功耗最大,A、C組次之,D組最小,各組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);A組神經(jīng)的極限應(yīng)變最大,C、D組次之,B組最小,各組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);B組韌度、彈性模量最大,C、D組次之,A組
4、最小;A、B組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其余各組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
結(jié)論:此實(shí)驗(yàn)以脫細(xì)胞神經(jīng)作為一種神經(jīng)替代移植物,通過脫細(xì)胞處理降低其免疫原性,并保留細(xì)胞外基質(zhì),從脫細(xì)胞后神經(jīng)基質(zhì)的組織學(xué)和生物力學(xué)性質(zhì)兩方面進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究,研究證明:與其它方法相比,改良化學(xué)方法能很好的去除雪旺細(xì)胞并保留神經(jīng)結(jié)構(gòu),并可以保證神經(jīng)移植物的生物力學(xué)特性。因此,經(jīng)改良化學(xué)方法處理后的神經(jīng)移植物可能更適宜在移植中
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