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1、組蛋白是真核生物體細(xì)胞中與DNA結(jié)合的堿性蛋白質(zhì)。在轉(zhuǎn)錄調(diào)控中,組蛋白在修飾酶的作用下,在N,端會產(chǎn)生不同形式的修飾,如甲基化、乙?;⒘姿峄虯DP-核糖基化等,這些修飾能夠調(diào)節(jié)染色質(zhì)中重要的功能性結(jié)構(gòu),影響整個基因轉(zhuǎn)錄程序。組蛋白修飾調(diào)節(jié)基因表達作用的機制在表觀遺傳學(xué)的研究中,通常被稱之為“組蛋白密碼”。組蛋白修飾異常會引起遺傳基因表達異常,導(dǎo)致各種疾病,如癌癥、糖尿病、炎癥、神經(jīng)性疾病和心血管疾病等,因此組蛋白修飾水平的分析對化學(xué)
2、治療與預(yù)防有著重要的意義。本論文針對組蛋白修飾水平分析研究領(lǐng)域的一些熱點難點,設(shè)計了組蛋白修飾水平的新型生物傳感分析方法,主要包括了組蛋白修飾酶活性的分析和組蛋白乙酰化修飾位點的分析。
1.基于金納米粒子可控組裝聚集設(shè)計了一種檢測組蛋白修飾酶活性的新型生物傳感方法。介導(dǎo)金納米粒子聚集的抗體不需要做前處理,在免疫識別時親和力強,提高了分析的靈敏度。用該方法分別檢測了組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶(HMT)和乙?;D(zhuǎn)移酶(HAT),并對相
3、應(yīng)的酶抑制劑做了篩選分析,其中甲基化轉(zhuǎn)移酶作用的位點是組蛋白H3第四位賴氨酸(Lys4),乙?;D(zhuǎn)移酶作用的位點是第十四位賴氨酸(Lys14)。該方法為酶活性檢測與酶抑制劑篩選提供了一個簡便、穩(wěn)定、選擇性好、靈敏度高的可視化檢測平臺。
2.基于金納米粒子可控組裝設(shè)計了一種組蛋白乙?;揎棛z測的耦合增強拉曼散射生物傳感新方法。該方法以金納米粒子為表面增強拉曼散射(SERS)基底,表面修飾乙?;M蛋白H3多肽為識別探針,對甲氧
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