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文檔簡介
1、目的:觀察飲水型重金屬鎘中毒時(shí),重金屬鎘在兔膝關(guān)節(jié)液及關(guān)節(jié)軟骨、滑膜組織中的含量分布情況;并分析其對(duì)兔膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞Ⅱ型膠原、蛋白聚糖、TIMP-1mRNA 以及MMP-13mRNA表達(dá)的影響,為加快對(duì)水資源重金屬污染的治理提供理論依據(jù)。
方法:40只2月半齡新西蘭大白兔隨機(jī)分為兩組,每組二十只,雌雄各半,初始體重300-330g,單籠喂養(yǎng)。對(duì)照組:正常飲用水飼養(yǎng);鎘暴露組:5mmol/L氯化鎘飲用水飼養(yǎng),飼養(yǎng)3個(gè)月后將兔
2、子耳緣靜脈空氣栓塞處死。分別取血液、骨骼、關(guān)節(jié)軟骨、滑膜,檢測(cè)其鎘重金屬含量;觀察關(guān)節(jié)軟骨大體形態(tài)變化;于兩側(cè)股骨內(nèi)髁處刮取大小約2 mm×2 mm×2mm的組織塊,電鏡觀察軟骨細(xì)胞形態(tài);同時(shí)刮取膝關(guān)節(jié)面軟骨至凍凝管,液氮冷凍保存。
提取 mRNA,并擴(kuò)增,然后用實(shí)時(shí)定量熒光反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(ReAltime RT-PCR)
法測(cè)定兔膝關(guān)節(jié)軟骨Ⅱ型膠原、蛋白聚糖、MMP-13、TIMP-1的表達(dá)量。
3、> 結(jié)果:
1、對(duì)照組和鎘暴露組的血液、骨骼及關(guān)節(jié)軟骨中都可檢測(cè)到鎘,并各組中均以骨骼中含量最高,依次高低均為軟骨和血液。鎘暴露組中血液、骨骼及關(guān)節(jié)軟骨鎘的含量與對(duì)照組相比,均明顯增加,且差異有顯著性(P<0.05)。
2、肉眼大體觀察對(duì)照組和鎘暴露組的形態(tài)未發(fā)現(xiàn)明顯變化。
3、電鏡顯示鎘暴露組軟骨細(xì)胞外形和細(xì)胞核外形不規(guī)則,細(xì)胞器減少,并可見脂滴和糖原顆粒;細(xì)胞外膠原排列紊亂。
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