利用MicroBCA法對三種材料表面固定的Fn分子進行定量表征研究.pdf

1、植入物的生物相容性是生物醫(yī)用材料需滿足的最基本要求。從材料表面與生物內環(huán)境相互作用調控的角度，對生物材料進行表面修飾改性是提高材料生物相容性、滿足臨床應用要求的關鍵。表面生物化是近年研究及應用最為廣泛的方法之一，此方法不會影響材料的本體性能，可基本保持所固定的生物分子的活性。對與蛋白質相互作用的表面進行活性及量化表征，可更深入地了解蛋白質和表面之間的相互作用，以及生物材料表面修飾等研究。
　　 本文主要通過MicroBCA法對F

2、n蛋白修飾的石英玻璃、純鈦薄膜、氧化鈦薄膜表面進行定量表征，并結合目前應用廣泛的FTIR、XPS、QCM等手段對其進行跟蹤分析。以期為探尋不同接枝形式對蛋白接枝量的變化情況，尋求最適接枝方式起一定的指導作用，服務于實際應用領域。
　　 (1)對于穩(wěn)定性較好的石英玻璃樣品，經過化學清洗、多聚賴氨酸化、共價固定Fn多步處理后，采用MicroBCA檢測手段檢測，結果顯示石英玻璃表面涂覆多聚賴氨酸后接枝Fn的固定量為308±14ng/c

3、m2。同時還使用XPS全譜及C/N/O高分辨、水接觸角、酸性橙Ⅱ等手段對每一階段處理樣品進行了定性或定量表征，了解了各步處理樣品表面的特性變化情況。
　　 (2)通過非平衡磁控濺射在石英玻璃表面沉積制得了純鈦薄膜。經過堿活化、多聚賴氨酸化或硅烷化兩種固定形式，將Fn分子共價固定在純鈦表面。采用MicroBCA法對石英基底純鈦薄膜表面的Fn蛋白進行定量，結果顯示以多聚賴氨酸形式接枝Fn的固定量為311±16ng/cm2，以硅烷化形

4、式接枝的Fn蛋白分子在鈦薄膜表面的固定量約為767ng/cm2。此外還將目前應用較為廣泛的QCM檢測與其作了比較，兩種手段得到的Fn的固定量極為接近，可以說明所測得樣品表面固定的Fn的量具有一定準確性。實驗中還通過水接觸角、傅立葉變換紅外光譜、XPS等分析證實了各步處理的樣品表面的特性變化情況。
　　 (3)利用非平衡磁控濺射設備，在石英玻片表面沉積制得氧化鈦薄膜。MicroBCA法檢測到石英基底氧化鈦薄膜表面以多聚賴氨酸形式接

5、枝Fn的固定量為386±6ng/cm2。同樣還結合傅立葉變換紅外光譜、X射線光電子能譜、水接觸角及酸性橙反應等檢測表征了各步處理后表面性質和化學成分的變化，證實了經過本文的特殊處理后，可以將Fn分子更有效地共價固定到氧化鈦表面。
　　 (4)MicroBCA檢測結果說明共價固定Fn的不同材料表面會對其固定的量產生一定的影響，同時本文研究表明不同形式的接枝蛋白手段也會影響蛋白的接枝量。
　　 (5)本文在不改變材料表面的性