Rebaudioside-A分離純化新工藝研究.pdf

1、Rebaudioside-A是甜菊糖苷混合物中所含苷類的一種，與所含的其它糖苷相比，它的甜度約為蔗糖的350～450倍，無后苦味。現(xiàn)今發(fā)現(xiàn)Rebaudioside-A的含量越高，甜味越純正，且甜菊糖苷被廣泛用于醫(yī)藥、食品飲料等領(lǐng)域，因此，研究提高甜菊糖苷產(chǎn)品中Rebaudioside-A的含量有著非常重要的意義。
　　 本文以甜菊糖苷作為研究對象，先利用超聲波輔助酶法從甜葉菊中提取甜菊糖苷，并通過正交試驗優(yōu)化提取條件;然后將甜菊

2、糖苷作為原料，利用硅膠柱層析的方法分離出Rebaudioside-A，同樣用正交試驗優(yōu)化分離條件，從而找到最優(yōu)分離條件;之后又將甜菊糖苷先通過結(jié)晶法分離出Rebaudioside-A，然后用大孔吸附樹脂對母液中的甜菊苷和Rebaudioside-A組分進行分離純化。得到的相關(guān)結(jié)論如下:
　　 (1)通過單因素實驗及正交試驗對提取條件的優(yōu)化，結(jié)果顯示:在液料比(V/W)為12，提取溶液pH為4.5～5.5，酶的質(zhì)量濃度為0.15％

3、，超聲時間為80min，提取溫度為60℃，以及超聲功率為50W的條件下，合并四次提取液，得到甜菊糖苷的提取率為12.9％。與傳統(tǒng)的提取法相比，超聲波輔助纖維素酶提取甜菊糖苷的方法既縮短了提取所需的時間，也降低了提取所需的溫度，從而節(jié)省了能耗。
　　 (2)提取液的除雜過程中，用脫色率和甜菊糖苷的損失率來確定復合絮凝劑硫酸鋁鉀和氧化鈣的用量。結(jié)果表明，當硫酸鋁鉀與氧化鈣的用量比為1.4∶1時，提取液的脫色率最大，提取液中甜菊糖苷的

4、損失率較小。
　　 (3)硅膠柱層析分離Rebaudioside-A的實驗中，先將樣品的加樣形式、洗脫過程中是否加壓以及洗脫劑種類進行初選實驗，結(jié)果表明:甜菊糖苷與硅膠的拌樣、洗脫時加壓以及二氯甲烷與甲醇按一定比例混合的洗脫劑對分離Rebaudioside-A影響較大。之后對甜菊糖苷的上樣量、上柱的硅膠量、洗脫劑的配比及洗脫過程中的流速進行單因素實驗和正交試驗，經(jīng)分析，當上樣量與硅膠量的比例為1∶17.5，洗脫劑二氯甲烷與甲醇的

5、配比為3∶2，流速為60滴/min時，可得到純度為93.4％的Rebaudioside-A，并且收率可達到51.3％。而且用此條件進行放大實驗，所得的結(jié)果很接近，可靠性好，并且也得到了純度高達為95.1％的Rebaudioside-A。
　　 (4)甜菊糖苷是由多種苷類組成，其中包括Rebaudioside-A和甜菊苷，一般甜菊糖苷經(jīng)結(jié)晶后，母液中還含有Rebaudioside-A和大量的甜菊苷。本實驗先將甜菊糖苷進行結(jié)晶，得到