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1、金納米顆粒作為優(yōu)良的光學(xué)探針被廣泛應(yīng)用于分析領(lǐng)域,人們根據(jù)靶物引起其理化性質(zhì)的改變可以建立不同策略的分析方法。其中基于金納米顆粒局域表面等離子共振(LSPR)性質(zhì)建立的分析方法已較為成熟,基于金納米顆粒模擬酶性質(zhì)的應(yīng)用也逐漸發(fā)展起來(lái),兩種策略都能實(shí)現(xiàn)可視化分析。本文通過(guò)研究靶物對(duì)金納米顆粒這兩種性質(zhì)的影響建立了簡(jiǎn)便、靈敏、通用的可視化分析方法,拓展了金納米顆粒在生化分析中的應(yīng)用。具體研究?jī)?nèi)容如下:
(1)金納米顆粒顏色數(shù)值
2、分析法檢測(cè)奎尼丁。金納米顆粒具有較強(qiáng)的局域表面等離子共振吸收,因此其膠體溶液呈現(xiàn)鮮明的顏色,并且當(dāng)金納米顆粒處于不同狀態(tài)時(shí),其溶液顏色也不相同,構(gòu)成了基于金膠LSPR性質(zhì)的可視化分析的基礎(chǔ)。藥物小分子奎尼丁能使表面活性劑FSN-100包被的金納米顆粒發(fā)生聚集,膠體溶液由酒紅色變?yōu)樗{(lán)紫色。使用RGB顏色系統(tǒng)讀取溶液的顏色值,分析其顏色值變化,發(fā)現(xiàn)R值與奎尼丁濃度的自然對(duì)數(shù)呈線性關(guān)系,線性范圍為112~384nmol/L,檢測(cè)限為96nmo
3、l/L。該方法的靈敏度、精密度與常規(guī)的紫外-可見(jiàn)分光光度法相當(dāng)。更重要的是,顏色數(shù)值分析法僅用數(shù)碼相機(jī)及圖像分析軟件(Image-ProPlus)就能完成,成本低廉,操作簡(jiǎn)單易行。
(2)DNA增強(qiáng)金納米顆粒過(guò)氧化物模擬酶活性檢測(cè)K+。金納米顆粒具有過(guò)氧化物模擬酶活性,即當(dāng)有雙氧水存在時(shí),能夠催化過(guò)氧化物酶底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)發(fā)生氧化反應(yīng),使其由原來(lái)的無(wú)色物質(zhì)變?yōu)樗{(lán)色氧化產(chǎn)物,并在650nm處出現(xiàn)
4、特征吸收峰。研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)金納米顆粒表面包被上ssDNA后,模擬酶活性得到增強(qiáng),能催化更多的TMB發(fā)生氧化反應(yīng)。使用與K+特異性結(jié)合的ssDNA包被于金膠表面,當(dāng)加入K+時(shí),ssDNA形成G-4折疊結(jié)構(gòu)而從金膠表面脫落,模擬酶活性降低,650nm處的吸收也隨之降低,溶液顏色變淺,基于此建立了檢測(cè)K+的可視化分析方法。以650nm處吸收值變化(△A650)對(duì)K+濃度的自然對(duì)數(shù)進(jìn)行擬合,發(fā)現(xiàn)在1.5×10-4~2.8×10-3mol/L范圍內(nèi)
5、有良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)r=0.9916,與其他各種價(jià)態(tài)的金屬離子相比,該方法對(duì)K+有良好的選擇性。
總之,本文基于金納米顆粒兩種不同的性質(zhì),分別建立了藥物小分子及金屬離子的可視化分析方法。本研究的創(chuàng)新點(diǎn)在于:一是將顏色數(shù)值分析法引入金納米顆粒的可視化分析中,使得檢測(cè)更為簡(jiǎn)單、迅速;二是利用DNA對(duì)金納米顆粒的模擬酶活性進(jìn)行了調(diào)控,并在此基礎(chǔ)上發(fā)展了全新的分析策略。兩種可視化分析方法都具有一定的通用性,為金納米顆粒在生化
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