非標記型電化學核酸適配體生物傳感器的研究.pdf

1、核酸適配體是通過指數(shù)富集配體系統(tǒng)進化技術篩選出來的,能夠與目標靶分子高效特異性結合的單鏈DNA或RNA寡聚核苷酸,相較于抗體有許多優(yōu)勢。近年來,基于核酸適配體和目標靶分子之間的特異性結合的生物傳感技術受到了越來越廣泛的關注。其中,非標記型核酸適配體生物傳感器以其信號強,成本低的優(yōu)勢成為研究重點。
　　本論文以凝血酶和腺苷為主要研究模型,以聚硫堇和鐵氰化物為氧化還原探針,以各自的核酸適配體為目標分子識別元件,構建非標記型電化學核酸適

2、配體生物傳感器,并對其性質(zhì)和應用進行了詳細研究探討。具體內(nèi)容如下:
　　(1)在玻碳電極表面以電聚合法制備了聚硫堇氧化還原電化學探針,以金納米粒子為固定核酸適配體的載體,構建了非標記型核酸適配體生物傳感器。利用電化學阻抗譜對傳感器的組裝過程進行了監(jiān)測,用循環(huán)伏安法和差分脈沖伏安法對傳感器的電化學行為進行了研究。該傳感器對凝血酶的檢測在1.0 pg/mL~500 ng/mL范圍內(nèi)成良好的線性關系,相關系數(shù)為0.998,檢測限為0.3

3、8 pg/mL(S/N=3)。該傳感器對腺苷的檢測在10 pg/mL~1.0μg/mL范圍內(nèi)成良好的線性關系,相關系數(shù)為0.9986,檢測限為3.8 pg/mL(S/N=3)。
　　(2)在玻碳電極表面以電沉積法制備了鐵氰化物氧化還原電化學探針,以金納米粒子為固定核酸適配體的載體,構建了非標記型核酸適配體生物傳感器。利用電化學阻抗譜對傳感器的組裝過程進行了監(jiān)測,用循環(huán)伏安法和差分脈沖伏安法對傳感器的電化學行為進行了研究。以鐵氰化鈷

4、為探針的傳感器對凝血酶的檢測在1.0 pg/mL~1.0μg/mL范圍內(nèi)成良好的線性關系,相關系數(shù)為0.998,檢測限為0.28 pg/mL(S/N=3)。以鐵氰化鎳為探針的傳感器對凝血酶的檢測在1.0 pg/mL~1.0μg/mL范圍內(nèi)成良好的線性關系,相關系數(shù)為0.998,檢測限為0.24 pg/mL(S/N=3)。
　　(3)在玻碳電極表面先電沉積一層納米金,增強修飾電極的電子傳遞性能,隨后電沉積鐵氰化鎳氧化還原電化學探針,

5、以金納米粒子為固定凝血酶核酸適配體的載體,使凝血酶適配體組裝到電極上,再通過互補鏈雜交組裝腺苷適配體,成功構建了既可以檢測凝血酶又可以檢測腺苷的非標記型核酸適配體生物傳感器。利用電化學阻抗譜對傳感器的組裝過程進行了監(jiān)測,用循環(huán)伏安法和差分脈沖伏安法對該傳感器的電化學行為進行了研究。該傳感器對凝血酶的檢測在1.0 fg/mL~1.0μg/mL范圍內(nèi)成良好的線性關系,相關系數(shù)為0.996,檢測限為0.27 fg/mL(S/N=3)。該傳感器