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文檔簡介
1、pH檢測技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于各個領(lǐng)域,如農(nóng)業(yè)、工業(yè)、水污染處理、工程工藝、環(huán)境方面、生物醫(yī)藥和臨床應(yīng)用等等。據(jù)報道,正常生理pH值范圍在7.36~7.44之間,而細胞內(nèi)的酸化與細胞的凋亡存在相互關(guān)系。因而,pH值的精確測量對化學(xué)生物學(xué)研究具有十分重要的意義。目前,pH檢測技術(shù)的研究方法眾多,其中光學(xué)方法得到了人們的特別重視。但是,光學(xué)測量很容易受到光散射、光源輻射強度波動、探針濃度及分布的不均勻性,以及儀器的靈敏度等諸多因素的干擾。比率型
2、光學(xué)探針是通過測定兩個不同波長的峰強度,把其中一個峰的測量值作為參照,兩個峰的強度比值作為測定依據(jù),這類光學(xué)探針與只把一個峰作為測量值的普通光學(xué)探針相比,大大提高了其檢測精度和準(zhǔn)確度。因而雙峰比率探針也成為pH傳感技術(shù)中的一個非常重要的方法。本論文主要工作是利用本課題組設(shè)計合成的五種陽離子卟啉衍生物,它們的紫外吸收信號和熒光發(fā)射信號會隨pH的改變出現(xiàn)兩個甚至兩個以上的波長變化區(qū)間,將陽離子卟啉衍生物設(shè)計為比色和熒光雙峰比率pH探針,并進
3、一步研究了牛血清存在下對探針效果的影響,探針的細胞毒性,以及探針用于活細胞中的共聚焦熒光顯微鏡成像。這些研究表明,這五種陽離子卟啉作為比色和熒光比率pH探針具有測量范圍可調(diào),良好的可逆性及高準(zhǔn)確度,較低的生物毒性,并可應(yīng)用于pH生物傳感領(lǐng)域。
本論文的主要研究工作如下:
1)首次合成出文獻未見報道的水溶性陽離子卟啉衍生物TTAPoPP。
2)研究了本課題組設(shè)計、合成的五種陽離子卟啉衍生物在pH=2.1~8.
4、0下的紫外吸收和熒光發(fā)射光譜,探究了其作為比色和熒光雙峰比率pH探針的可能性及其pH感應(yīng)原理。
3)通過研究探針多次對pH感應(yīng)的循環(huán)效果,探針濃度對pH感應(yīng)的影響,以及不同緩沖液對探針感應(yīng)效果的影響,證明了陽離子卟啉pH探針具有良好的可逆性、高準(zhǔn)確度及適用范圍寬的優(yōu)點。
4)研究了TTAPoPP和TMMorEOPP在牛血清存在下的效果,探針的細胞毒性,以及探針在活細胞中的共聚焦熒光顯微鏡成像。初步的研究結(jié)果表明,這些
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