乳源蠟樣芽孢桿菌電化學納米免疫傳感器的研究.pdf

1、本研究結合電化學分析可實現在線檢測，不受樣品的濁度、顏色的影響，所需設備儀器相對簡單的特點以及酶促反應的高效性、免疫分析無需對樣品進行純化、富集等預處理的特點，以玻碳電極為基體電極，采用共價鍵合、靜電吸附和自組裝單分子層等生物分子固定技術，并借助納米金的吸附能力強、比表面積大、良好的生物相容性和隧道效應等特性以及殼聚糖良好的成膜性、機械性能、生物相容性等特性構建了性能良好的過氧化氫、牛IgG及蠟樣芽孢桿菌電化學傳感器應用于食品安全檢測分

2、析中。
　　本研究主要內容包括：⑴以交聯有辣根過氧化物酶的電子媒介體硫堇的殼聚糖為橋聯劑，吸附納米金于玻碳電極，借助納米金吸附固定HRP制備了過氧化氫生物傳感器。利用光譜掃描、生物薄膜干涉技術、循環(huán)伏安法及交流阻抗法表征了吸附、組裝的各個階段。利用計時電流法對H2O2進行測定，結果表明該生物傳感器檢測的線性范圍為1×10-7～1×10-4 mol/L，檢測限為5.0×10-8 mol/L。并對其壽命、穩(wěn)定性、重現性及選擇性進行了研

3、究，結果證實該傳感器具有一定的使用價值。⑵以殼聚糖作為橋聯劑連接金納米顆粒于玻碳電極，用納米金固定HRP標記的兔抗牛IgG構建了檢測牛免疫球蛋白 G的電化學免疫傳感器。通過交流阻抗法和循環(huán)伏安法表征電極組裝的各個過程電化學特性，用電流-時間法測定PBS緩沖液稀釋的標準牛免疫球蛋白 G。結果免疫反應前后穩(wěn)態(tài)電流的變化率與牛 IgG的質量濃度的對數在10-1～104 ng/mL范圍內線性相關，相關系數為0.9976。該傳感器重現性及穩(wěn)定性良

4、好，成本較低，操作方便簡單，可用于含牛免疫球蛋白G制品中牛IgG含量的定量檢測。⑶以殼聚糖為橋聯劑固定第一層納米金于玻碳電極并吸附固定抗蠟樣芽孢桿菌單克隆抗體，以滴電極方式將硫堇-殼聚糖/納米金-HRP復合物固定于上述電極并吸附抗蠟樣芽孢桿菌單克隆抗體構建了雙層納米金修飾的蠟樣芽孢桿菌電化學免疫傳感器。利用循環(huán)伏安法、交流阻抗法表征電極組裝的各個階段，利用計時電流法對蠟樣芽孢桿菌進行測定，結果該傳感器的響應電流與菌濃度在5×101～5×