犬股骨頭壞死模型的制備及相關基礎研究.pdf

1、1738年Munro首次描述股骨頭缺血性壞死以來,世界各國學者在該病的診治方面開展了大量研究。但由于股骨頭血供的獨特性,治療一直較困難,疾病晚期常出現(xiàn),最終需要行人工髖關節(jié)置換手術來恢復關節(jié)功能。對于青壯年,理想的治療方法仍是保守治療,保守治療關鍵是防止股骨頭塌陷,去除股骨頭內(nèi)壞死物質,重建血運?，F(xiàn)有多種保頭治療方法療法爭議較大,至今尚無能模仿人類股骨頭塌陷進程的理想壞死動物模型來用于評價這些治療方法。吻合血管的游離腓骨移植術是目前公認

2、最有效的保守療法,不僅能重建血運,還能有效支撐軟骨下骨,防止股骨頭塌陷。然而,這種療法仍需進步研究。目前尚無理想的動物模型能模擬游離腓骨治療股骨頭塌陷的過程。Beagle犬是一種成熟的大型實驗動物模型,具有人類似的腓骨結構。本研究使用犬進行相關研究,建立了Beagle犬股骨頭塌陷模型,為進一步的游離腓骨等治療方法的研究提供動物模型基礎。同時造模中研究髖關節(jié)關節(jié)液中葡萄糖和乳酸含量,VEGF、IGF、BMP的表達情況和在血漿中的含量,以及

3、軟骨的變化等相關基礎研究。
　　 第一部分犬股骨頭壞死模型的制備
　　 目的:比較多種不同的股骨頭壞死造模方法的造模效果,建立犬股骨頭壞死塌陷模型。方法:選取成年Beagle犬34只,分成液氮冷凍組、無水酒精灌注組、血供破壞組、液氮冷凍加血供破壞組、單純手術組五組。液氮冷凍加血供破壞組10只,其它每組6個樣本量。采取犬髖關節(jié)前方入路,分別進行X線、MRI、標本的大體和組織學觀察。結果:單純手術組術后各期都未見明顯的股骨頭

4、壞死表現(xiàn)。血供破壞組、液氮冷凍組、無水酒精組均看到早期股骨頭壞死,無明顯股骨頭塌陷表現(xiàn)。在液氮冷凍加血供破壞組各期壞死表現(xiàn)更為明顯,術后12周,多數(shù)呈塌陷表現(xiàn)。結論:液氮冷凍加血供破壞的方法是一種有效的股骨頭壞死塌陷的造模方法。前側入路,術中不切斷肌肉,是顯露犬股骨頭的一種較好方法。整個造模的操作不影響進一步游離腓骨治療股骨頭壞死等相關研究。
　　 第二部分:壞死模型關節(jié)液中的葡萄糖、乳酸含量測定
　　 目的:研究股骨頭

5、壞死關節(jié)液中的葡萄糖和乳酸含量。方法:使用第一部分介紹的動物模型,提取關節(jié)液進行葡萄糖和乳酸含量分析。結果:股骨頭壞死后出現(xiàn)了葡萄糖和乳酸含量變化。隨著壞死程度的加重,葡萄糖含量降低,乳酸含量升高。結論:股骨頭壞死后關節(jié)液可能呈無氧代謝表現(xiàn)。關節(jié)液中的葡萄糖和乳酸對于股骨頭壞死的研究有一定參考價值。
　　 第三部分:壞死模型中VEGF、IGF、BMP的表達以及外周血中含量的測定
　　 目的:測定創(chuàng)傷型股骨頭壞死中VEGF

6、、IGF、BMP的表達以及外周血中含量。方法:比較術后12周液氮冷凍加血供破壞組和正常的股骨頭中VEGF、IGF、BMP表達的分析；在術后不同時期分別抽取犬外周靜脈血ELISA方法進行VEGF、IGF、BMF含量的分析。結果:術后12周VEGF、IGF、BMP含量均降低。VEGF、IGF、BMP在血漿中的含量在股骨頭壞死各期無明顯差異。結論:股骨頭壞死塌陷以后VEGF、IGF、BMP的表達均降低,說明壞死可能仍有進展。VEGF、IGF、