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文檔簡介
1、目的:
本實驗采用微弧氧化(Micro-arc oxidation,MAO)技術,在純鈦表面構建不同的TiO2氧化膜層,以拋光純鈦作為對照組,對各組試樣進行表面特性分析,并通過體外細胞實驗檢測各氧化膜層對MG63細胞早期黏附、增殖的影響,進而選擇一種具有良好生物學性能的TiO2氧化膜層,給進一步的研究提供理論依據。
方法:
實驗共分三組:機械拋光純鈦作為對照組(A組);對機械拋光純鈦進行不同條件的微弧氧化處
2、理,方法分別為:0.1mol/L四硼酸鋰電解液中,465V電壓、600Hz頻率、9%占空比下微弧氧化反應2min(B組);0.1mol/L四硼酸鋰電解液中,465V電壓、600Hz頻率、11%占空比下微弧氧化反應13min(C組)。采用掃描電子顯微鏡(SEM)和X射線衍射(XRD)實驗分析各組試樣表面形貌及相組成;通過接觸角實驗檢測試樣表面親水性。將入骨肉瘤細胞(MG63)分別接種于各組試樣表面,利用掃描電子顯微鏡和DAPI染色法分析細
3、胞對試樣的早期黏附與鋪展情況;利用CCK8法進行試樣表面的細胞增殖檢測。所得數(shù)據利用SPSS21.0軟件進行單因素方差分析。
結果:
1、表面形貌與相組成分析:SEM下,A組表面較光滑,有不規(guī)則機械劃痕存在;B組表面密集分布著直徑在0.01~0.3μm范圍內的孔隙;;組表面可見許多“溝”、“回”,寬度在3~7μm范圍內,形成似蠕蟲狀高度粗糙的表面形態(tài)。XRD結果顯示,B、C組氧化膜層均以金紅石相為主,含少量銳鈦礦相。
4、
2、接觸角分析:B、C組的靜態(tài)水接觸角均小于A組,差異具有顯著性(P<0.05),接觸角從小到大排序為:C組<B組<A組。
3、細胞的早期黏附:DAPI染色結果顯示,各組試樣表面單位面積內細胞黏附數(shù)量均隨培養(yǎng)時間延長而增加。復合培養(yǎng)2h、6h后,B、C組單位面積內細胞黏附數(shù)量均高于A組,差異具有顯著性(P<0.05);2h、6h、24h后,細胞黏附數(shù)量排序均為:C組>B組>A組。SEM下,隨著復合培養(yǎng)時間的延長,A
5、組細胞由圓梭形伸展為長梭形;B組細胞由橢圓形伸展為長梭形;C組細胞在培養(yǎng)2h時開始向四周呈多邊形鋪展,并伸出許多偽足,隨著培養(yǎng)時間的延長,細胞與試樣黏結更加牢固,細胞間連接更加緊密。
4、細胞增殖水平:培養(yǎng)1d、3d、5d、7d后,各組光密度(OD)值均隨復合培養(yǎng)時間的延長而增加。且每個時間點,B、C組OD值均高于A組。1d、3d時,C組OD值高于A組,差異具有顯著性(P<0.05)。5d、7d時,C組OD值略低于B組,但差異
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