純鈦表面微弧氧化膜層的生物學(xué)性能研究.pdf

1、目的:
　　本實(shí)驗(yàn)采用微弧氧化(Micro-arc oxidation，MAO)技術(shù)，在純鈦表面構(gòu)建不同的TiO2氧化膜層，以拋光純鈦?zhàn)鳛閷?duì)照組，對(duì)各組試樣進(jìn)行表面特性分析，并通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各氧化膜層對(duì)MG63細(xì)胞早期黏附、增殖的影響，進(jìn)而選擇一種具有良好生物學(xué)性能的TiO2氧化膜層，給進(jìn)一步的研究提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　實(shí)驗(yàn)共分三組:機(jī)械拋光純鈦?zhàn)鳛閷?duì)照組（A組）;對(duì)機(jī)械拋光純鈦進(jìn)行不同條件的微弧氧化處

2、理，方法分別為:0.1mol/L四硼酸鋰電解液中，465V電壓、600Hz頻率、9％占空比下微弧氧化反應(yīng)2min（B組）;0.1mol/L四硼酸鋰電解液中，465V電壓、600Hz頻率、11％占空比下微弧氧化反應(yīng)13min（C組）。采用掃描電子顯微鏡(SEM)和X射線衍射(XRD)實(shí)驗(yàn)分析各組試樣表面形貌及相組成;通過接觸角實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試樣表面親水性。將入骨肉瘤細(xì)胞(MG63)分別接種于各組試樣表面，利用掃描電子顯微鏡和DAPI染色法分析細(xì)

3、胞對(duì)試樣的早期黏附與鋪展情況;利用CCK8法進(jìn)行試樣表面的細(xì)胞增殖檢測(cè)。所得數(shù)據(jù)利用SPSS21.0軟件進(jìn)行單因素方差分析。
　　結(jié)果:
　　1、表面形貌與相組成分析:SEM下，A組表面較光滑，有不規(guī)則機(jī)械劃痕存在;B組表面密集分布著直徑在0.01～0.3μm范圍內(nèi)的孔隙；;組表面可見許多“溝”、“回”，寬度在3～7μm范圍內(nèi)，形成似蠕蟲狀高度粗糙的表面形態(tài)。XRD結(jié)果顯示，B、C組氧化膜層均以金紅石相為主，含少量銳鈦礦相。

4、
　　2、接觸角分析:B、C組的靜態(tài)水接觸角均小于A組，差異具有顯著性(P＜0.05)，接觸角從小到大排序?yàn)?C組＜B組＜A組。
　　3、細(xì)胞的早期黏附:DAPI染色結(jié)果顯示，各組試樣表面單位面積內(nèi)細(xì)胞黏附數(shù)量均隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)而增加。復(fù)合培養(yǎng)2h、6h后，B、C組單位面積內(nèi)細(xì)胞黏附數(shù)量均高于A組，差異具有顯著性(P＜0.05);2h、6h、24h后，細(xì)胞黏附數(shù)量排序均為:C組＞B組＞A組。SEM下，隨著復(fù)合培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，A

5、組細(xì)胞由圓梭形伸展為長(zhǎng)梭形;B組細(xì)胞由橢圓形伸展為長(zhǎng)梭形;C組細(xì)胞在培養(yǎng)2h時(shí)開始向四周呈多邊形鋪展，并伸出許多偽足，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞與試樣黏結(jié)更加牢固，細(xì)胞間連接更加緊密。
　　4、細(xì)胞增殖水平:培養(yǎng)1d、3d、5d、7d后，各組光密度(OD)值均隨復(fù)合培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。且每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，B、C組OD值均高于A組。1d、3d時(shí)，C組OD值高于A組，差異具有顯著性(P＜0.05)。5d、7d時(shí)，C組OD值略低于B組，但差異