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1、首先,采用乙醇回流提取山蔥中的總酚類物質(zhì),經(jīng)柱層析、薄層層析和高效液相分離、純化,獲得單體化合物;通過一維、二維核磁、高分辨質(zhì)譜等手段鑒定所分化合物結(jié)構(gòu),其中8個(gè)為黃酮類物質(zhì),化合物5、6為結(jié)構(gòu)新穎的化合物。
其次,采取鐵離子螯合法、DPPH自由基清除法和鐵氰化鉀還原法研究了分離所得的8個(gè)黃酮類化合物的體外抗氧化能力。8個(gè)黃酮類化合物在3種不同方法的測(cè)試下都體現(xiàn)出了較高的抗氧化能力,但強(qiáng)弱順序并不完全一致。在鐵離子螯合測(cè)試中,
2、化合物1、2、6、3的活性較高,依次為0.516±0.013、0.478±0.0082、0.461±0.0076和0.453±0.0070EDTA當(dāng)量;在DPPH自由基清除實(shí)驗(yàn)中,1、2、3的活性遠(yuǎn)超其他黃酮化合物,依次為7.15±0.16、6.06±0.17和3.73±0.14抗壞血酸當(dāng)量;在鐵氰化鉀還原實(shí)驗(yàn)中,化合物1、2、3表現(xiàn)較強(qiáng)的還原能力,依次為7.87±0.11,6.73±0.10,2.65±0.056抗壞血酸當(dāng)量。結(jié)合實(shí)驗(yàn)
3、所得數(shù)據(jù)與化合物結(jié)構(gòu),初步探討了其構(gòu)效關(guān)系。
再次,采用熒光光譜分析法研究了化合物1、2、3、6與牛血清白蛋白(BSA)相互作用。結(jié)果顯示:4種黃酮化合物與牛血清白蛋白作用后,均可以導(dǎo)致內(nèi)源熒光發(fā)生急劇的猝滅現(xiàn)象,程度隨著黃酮化合物溶液濃度的增大而增強(qiáng),猝滅現(xiàn)象均是倆者靜態(tài)結(jié)合的結(jié)果。在實(shí)驗(yàn)設(shè)定的溫度下,它們與牛血清白蛋白之間近似產(chǎn)生一個(gè)結(jié)合位點(diǎn),即生成1∶1復(fù)合物。通過進(jìn)一步計(jì)算分析,推測(cè)出它們與BSA的作用力以疏水作用力為
4、主,其中化合物1、3和6還表現(xiàn)出一定程度的氫鍵作用力。
最后,研究了蒜氨酸在水中的熱分解動(dòng)力學(xué)過程,擬合得到了動(dòng)力學(xué)參數(shù):活化能為80.5kJ/mol,指前因子為1.27×107。通過氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)熱分解產(chǎn)物,發(fā)現(xiàn)隨著溫度升高,二烯丙基二硫醚的含量由91.59%持續(xù)降低至53.62%,而二烯丙基三硫醚的含量則先增加后減少,二烯丙基四硫醚的含量持續(xù)增加,說明高溫度促進(jìn)硫醚類化合物的斷裂和重排。采取質(zhì)譜和2,4二硝基苯肼法分析液相產(chǎn)
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