腹瀉康治療脾虛泄瀉證的療效與作用機制研究.pdf

1、脾虛泄瀉證是一種以腹瀉、體重下降、畏寒、倦怠等為主要表現(xiàn)的中醫(yī)病證，病證范疇較廣，包括現(xiàn)代醫(yī)學的慢性腹瀉、潰瘍性結腸炎、腸易激性綜合征、消化道腫瘤等多種疾病。由于尚缺乏治療效果較好的西藥，因此廣大醫(yī)學工作者把目光投注于在中醫(yī)理論指導下從多層次、多臟器治療疾病的傳統(tǒng)中醫(yī)藥。中藥復方腹瀉康經(jīng)過系統(tǒng)臨床觀察，具有健脾益氣、緩急止痛、澀腸止瀉等作用，臨床緩解治愈率達90％以上，具有較好的臨床推廣意義，值得深入研究。 脾虛泄瀉證病因和發(fā)病

2、機制復雜，較難制作出能全面反映與中醫(yī)證候密切相關的動物模型來評價相關的治療藥物，對于該證動物模型的研究迫在眉睫。本研究結合已有的文獻報道，制作和比較了多種大鼠脾虛泄瀉證模型，發(fā)現(xiàn)番瀉葉灌服加乙酸灌腸法制作的模型，其癥狀和各項客觀指標的變化與該證中醫(yī)病證特點及現(xiàn)代醫(yī)學的對應疾病最為吻合，優(yōu)于其他模型。因此，可以在這種模型上進行相關治療藥物的評價。 根據(jù)《中藥新藥研究指南》相關要求，應用所建立的模型對腹瀉康進行藥效學評價，發(fā)現(xiàn)腹瀉康

3、有一定的鎮(zhèn)痛作用，能延緩正常小鼠小腸推進速度，改善大鼠模型的一般癥狀，保護腸黏膜，改善消化吸收和免疫功能，顯著降低MPO、NOS和iNOS的活性，降低NO的含量，減輕炎性細胞浸潤和氧自由基損傷等，對脾虛泄瀉證模型具有明顯的療效。 為進一步研究腹瀉康治療脾虛泄瀉證的分子機理，本研究采用蛋白質組學等相關技術探索腹瀉康分別作用于動物模型前后的蛋白質表達差異，尋找相關蛋白質群。結果發(fā)現(xiàn)大鼠脾虛泄瀉證模型結腸組織中主要有5個蛋白表達上調，

4、5個蛋白表達下調，這些蛋白主要包括與過氧化反應有關的Cu/Zn超氧化物歧化酶、DJ-1蛋白，與自身免疫有關的核內不均一核糖核蛋白A2/B1、凝溶膠蛋白，與能量代謝有關的線粒體肌酸激酶、線粒體ATP合酶D鏈、電壓依賴性陰離子通道2，與細胞凋亡有關的肌動蛋白，與異常增生有關的結蛋白，與凝血有關的血凝酶；脾臟組織中主要有9個蛋白表達下調，與泛素一蛋白酶體降解途徑有關的蛋白酶體α-2亞基，與細胞凋亡過程細胞骨架動力學變化有關的鳥苷解離抑制蛋白α

5、、β、肌球蛋白Ⅱ輕鏈和原肌球蛋白α-1鏈，與細胞生長和分化有關的碳酸酐酶Ⅰ、Ⅱ和Ran蛋白。腹瀉康在不同程度上逆轉造模對大鼠結腸和脾臟蛋白質表達的影響，提示可能通過抵抗氧化應激反應損傷、減輕自身免疫應答、減少細胞凋亡、改善線粒體呼吸功能、調節(jié)泛素-蛋白酶體降解和細胞生長、分化等多條途徑發(fā)揮藥效。 本研究完成了脾虛泄瀉證動物模型的篩選和建立，腹瀉康治療脾虛泄瀉證的療效評價，并用蛋白質組學技術對其作用機制進行了初步探討，為進一步深入