攜載黃芪甲苷和阿魏酸的靜電紡纖維促進(jìn)血管生成的研究.pdf

1、原發(fā)性病變及外傷等許多因素都可以導(dǎo)致血液循環(huán)不暢或者缺血，此外組織和器官的移植以及構(gòu)建中也需要血管來輸送足夠的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)并排除代謝廢棄物，否則就會導(dǎo)致組織或器官的壞死，嚴(yán)重威脅人體健康。體外構(gòu)建的組織植入體內(nèi)后，氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)能否輸入是組織存活的關(guān)鍵，這就決定細(xì)胞距離最近的血管不得超過200μm。因此體外構(gòu)建的組織要在植入體內(nèi)后能存活就必須要有足夠的血管生成。
　　靜電紡纖維具有比表面積大、孔隙率高、類似細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的

2、結(jié)構(gòu)以及良好的孔道連通性等特點(diǎn)，有利于細(xì)胞黏附、鋪展生長和組織形成。同時電紡纖維易于攜載藥物、生物活性物質(zhì)等，可有效促進(jìn)組織的修復(fù)和再生。臨床應(yīng)用表明中藥黃芪和當(dāng)歸均具有行氣活血的作用，在促進(jìn)血管生成相關(guān)因子的表達(dá)、血管相關(guān)細(xì)胞的生長和遷移、成熟血管形成等方面顯示出獨(dú)特優(yōu)勢。本論文采用黃芪的主要有效成分黃芪甲苷(AT)、當(dāng)歸的主要有效成分阿魏酸(FA)，利用電紡纖維攜載中藥作為組織工程支架，研究血管相關(guān)細(xì)胞的增殖和胞外基質(zhì)分泌，評價促進(jìn)

3、血管形成和成熟的效果。
　　通過細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)篩選AT和FA促進(jìn)人氣靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)和人臍靜脈平滑肌細(xì)胞(HUVSMC)增殖的最佳濃度和比例。當(dāng)AT和FA的總濃度為5.0μg/mL，且兩者比例為7:3時，能最大限度的促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的增殖。通過共混電紡制備得到了攜載AT和FA的PELA超細(xì)纖維。纖維形貌規(guī)整，無液滴和斷裂，平均直徑約為2μm。體外釋放實(shí)驗(yàn)表明，兩種藥物均能在長達(dá)4周的時間內(nèi)持續(xù)釋放。載0.25％

4、AT和0.5％FA的纖維中20天內(nèi)累積釋放量分別為50.5％和69.1％，與纖維中相應(yīng)藥物含量相比，F(xiàn)A釋放稍快。體外細(xì)胞評價表明，與空白纖維、浸潤自由藥物的纖維相比，載藥纖維能促進(jìn)細(xì)胞的粘附和增殖，能促進(jìn)HUVEC分泌粘連蛋白、Ⅳ型膠原、HUVSMC分泌a肌動蛋白、Ⅰ型膠原，且載藥比例為7/3時能促進(jìn)作用最大。纖維植入大鼠皮下，結(jié)果表明各組纖維的降解和炎癥反應(yīng)無顯著差別，到第四周時有少量降解碎片、輕度的慢性炎癥反應(yīng)，降解支架周圍組的織