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1、DNA復(fù)制是細(xì)胞的基本功能之一,在生長發(fā)育過程中,染色體必須準(zhǔn)確無誤地復(fù)制并分配到下一代細(xì)胞中。因此,復(fù)制過程受到極其嚴(yán)格的調(diào)控,任何失控必將導(dǎo)致嚴(yán)重的后果,包括發(fā)育異常、遺傳疾病、癌癥等。在復(fù)制的研究領(lǐng)域,確定真核生物復(fù)制起始點或復(fù)制子是一個重要方面。
酵母是一類低等真核生物,既具有類似原核生物的生長特性,又具有一般真核生物的分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)特性,是作為確定研究復(fù)制起始位點或者復(fù)制子的一個重要材料。酵母III號染色體是
2、最早完成測序的,也是目前研究的最清楚的。自主復(fù)制序列ARS(autonomously replicating sequence)是能有效轉(zhuǎn)化酵母并能在細(xì)胞內(nèi)自主復(fù)制的一段DNA序列,在整合到酵母染色體后,能作為酵母的復(fù)制起始位點。
ARS305是釀酒酵母III號染色體上一個高活性的,使用頻率很高的復(fù)制子。為了研究其兩側(cè)序列對其活性的影響,本文構(gòu)建了以pRS405為載體,插入不同長度的以ARS305為核心、兩側(cè)序列不同的一系列重
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