2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、在細菌中,電子傳遞鏈是氧化代謝的關(guān)鍵元素。氧化葡萄糖酸桿菌(Gluconobacteroxydans)分離自腐敗的橘子中,是生物產(chǎn)業(yè)中的重要菌種。本研究主要從氧化葡萄糖酸桿菌細胞色素bd氧化酶功能及其應用替代兩方面展開工作,確定它在氧化呼吸交替途徑上的功能及可能的電化學替代,為實現(xiàn)生物轉(zhuǎn)化反應途徑的調(diào)控,提高細胞的比活力和催化反應的效率,整體上提升微生物的轉(zhuǎn)化能力打下堅實的理論基礎(chǔ)。主要研究如下:
   第一,細胞色素bd氧化酶

2、的功能確定
   成功克隆了細胞色素bd氧化酶串聯(lián)基因gox0278gox0279,構(gòu)建了攜帶cytobd::Km基因的自殺重組質(zhì)粒pSUP202/cytobd::Km,采用三親本接合方法將重組質(zhì)粒導入野生型氧化葡萄糖酸桿菌中,通過同源交換獲得了細胞色素6談變菌株G cytobd::Km。通過生理生化實驗研究突變菌株與野生菌株的區(qū)別,揭示細胞色素bd氧化酶的功能:突變株與野生型相比,突變菌株生物量明顯降低,生長緩慢;在低氧情況下

3、,呼吸速率由0.014 O2mg/(s.g)降至0.0065O2mg/(s.g),呼吸強度明顯降低。由此推測,氧化葡萄糖酸桿菌中存在細胞色素bd氧化酶,并在氧化調(diào)控中發(fā)揮著重要作用。
   第二,細胞色素bd氧化酶的電化學替代
   以細胞膜轉(zhuǎn)化甘油生產(chǎn)1,3-二羥基丙酮這一反應為例,研究細胞色素bd氧化酶的電化學替代,分離純化依賴依賴輔基吡咯喹啉醌(Pyrroloquinoline Quinone,PQQ)膜結(jié)合甘油脫

4、氫酶(Glyceroi dehydrogenase,GDH),設(shè)計反應裝置,以鐵氰化鉀為電子媒介體,采用生物電化學法,再生甘油脫氫酶的輔基PQQ,利用電化學方法代替細胞色素bd酶在反應末端的氧化作用,解除細胞色素bd酶對催化反應的限制。成功設(shè)計生物電化學反應裝置,在28±2℃,370mV電壓下反應18h,DHA濃度達到27.213g/L。
   第三,細胞色素bd氧化酶基因調(diào)控初步研究
   通過設(shè)計特異性引物,采用融合

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