產(chǎn)葡萄糖氧化酶黑曲霉菌株篩選誘變及葡萄糖酸鈣發(fā)酵條件的優(yōu)化研究.pdf

1、從采集的土壤中培養(yǎng)分離黑曲霉菌,用篩選培養(yǎng)基初選出產(chǎn)葡萄糖氧化酶較高的菌株,經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)基生產(chǎn)葡萄糖氧化酶后用分光光度分析法測(cè)定酶活進(jìn)行二次篩選。優(yōu)選出酶活最高的黑曲霉菌株P(guān)-9,其酶活為11.5U/g。將該菌株作為出發(fā)菌株,分別采用紫外線和鈷放射線進(jìn)行誘變。對(duì)獲得的180個(gè)突變菌株,用含有2-脫氧-D-葡萄糖的培養(yǎng)基進(jìn)行分離篩選,共獲得7個(gè)耐受2-脫氧-D-葡萄糖的菌株。對(duì)7個(gè)耐受菌株再次采用篩選培養(yǎng)基進(jìn)行初選,分光光度分析法活性測(cè)定二

2、次篩選。7個(gè)耐受菌株中有4個(gè)的產(chǎn)葡萄糖氧化酶活性大于它們的母本菌株P(guān)-9。生產(chǎn)水平最高的是U-69菌株,為28.7U/g,是出發(fā)菌株P(guān)-9的2.5倍。對(duì)優(yōu)選出來的U-69菌株生產(chǎn)的酶活優(yōu)化條件進(jìn)行分析,對(duì)比采用此菌株發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖酸鈣的最優(yōu)化條件。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,紫外誘變比鈷放射誘變獲得有效突變菌株較多。而且由紫外誘變獲得的突變菌株的產(chǎn)酶活性普遍較大;檢驗(yàn)菌株對(duì)2-脫氧-D-葡萄糖的耐受性,可以是一個(gè)判定菌株產(chǎn)酶綜合性能的