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文檔簡介
1、表面增強拉曼散射光譜(SERS),因其具有非侵入性非破壞性,水信號弱,高靈敏性,指紋特性,用樣量少及制樣簡單等特點而被廣泛應(yīng)用于生物研究領(lǐng)域。具有高的拉曼增強活性,無細胞毒性,生物兼容性好,小尺寸(<100nm),粒徑均一的納米材料的制備及其在生物活體組織中的研究應(yīng)用已成為很多研究小組關(guān)注的熱點。本文通過簡單易行的種子生長法制備了粒徑大小均一,核殼厚度可控的Au@Ag復(fù)合納米粒子,通過SERS成像技術(shù)對藥物進入細胞后的分布及代謝過程進行
2、了監(jiān)測,實現(xiàn)了在分子水平上藥物在細胞內(nèi)的吸收分布代謝的原位監(jiān)測。本文主要內(nèi)容包括以下方面:
1.介紹了拉曼散射的原理,表面增強拉曼散射(SERS)的發(fā)現(xiàn),機理,SERS襯底的制備,以及SERS技術(shù)在生物分析領(lǐng)域的應(yīng)用。
2.介紹了通過簡單易行的種子生長法合成了核.殼結(jié)構(gòu)的Au@Ag復(fù)合納米粒子,對其性質(zhì),形貌,拉曼增強活性進行了表征。發(fā)現(xiàn)該納米粒子不但具有均勻地粒徑,好的分散性,而且即使是在非團聚狀態(tài)下也具有
3、很高的拉曼增強效應(yīng),即具有較好的單粒子增強效應(yīng)。相對于目前依靠納米粒子團聚來獲取高信號強度的方法,Au@Ag納米粒子的這些特點更適合生物活體內(nèi)的研究。在體外環(huán)境下,研究了Au@Ag納米粒子對抗癌藥物6-巰基嘌呤(6-MP)及其衍生物(6-MPR)的拉曼增強光譜,檢測限分別達到5nM和50nM,遠遠超過了其在血液中的生理濃度(10-4.10-6M),分析了pH等對其光譜的影響,為下一步細胞實驗打下了基礎(chǔ)。
3.分別采用了分步
4、培養(yǎng)法和同步培養(yǎng)法,依靠SERS成像技術(shù)監(jiān)測了抗癌藥物6-巰基嘌呤在人非小細胞肺癌細胞株A549細胞內(nèi)的分布及代謝變化。由這兩種不同的培養(yǎng)方式可知,藥物與納米粒子分步培養(yǎng),雖然藥物進入細胞容易但是在細胞體系內(nèi)藥物與納米粒子的結(jié)合比較困難且具有隨機性,無法進行定量的分析,而且得到的藥物信號比較弱,不適合長時間監(jiān)測。而在同步培養(yǎng)方案中,由于藥物分子在體外與納米粒子混合后,通過N,S原子與金屬間的強作用力吸附在納米粒子表面,能夠得到很強的信號
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