檸檬酸新型清液發(fā)酵工藝研究.pdf

1、對(duì)實(shí)驗(yàn)室保藏的檸檬酸生產(chǎn)菌株，黑曲霉(Aspergillus niger)Wsy系列菌株進(jìn)行自然選育，從中篩選出一株以玉米粉為原料的檸檬酸生產(chǎn)高產(chǎn)菌株Wsy-03。
　　 通過(guò)實(shí)驗(yàn)，觀察高產(chǎn)黑曲霉Wsy-03菌株和低產(chǎn)黑曲霉Wsy-01生產(chǎn)菌株發(fā)酵過(guò)程中菌絲球的生長(zhǎng)變化情況。證明產(chǎn)酸越高的黑曲霉菌株，菌絲球越小。同時(shí)觀察發(fā)現(xiàn)，黑曲霉菌絲球會(huì)隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)，菌絲球中的菌絲體向外延伸的越來(lái)越多，菌絲球的纏繞也會(huì)越來(lái)越稀松。同時(shí)，

2、對(duì)檸檬酸發(fā)酵接種方式進(jìn)行研究，證明采用孢子接種時(shí)，雖然最終發(fā)酵產(chǎn)酸較高，但是發(fā)酵停滯期明顯要長(zhǎng)于菌絲球接種，從而使得發(fā)酵周期明顯延長(zhǎng)。綜合考慮各方面因素，本實(shí)驗(yàn)采取菌絲球接種的方法發(fā)酵檸檬酸。通過(guò)繪制黑曲霉Wsy-03的生長(zhǎng)曲線，和一并進(jìn)行的黑曲霉Wsy-03菌齡對(duì)發(fā)酵產(chǎn)酸的影響，證明最佳接種時(shí)間為種子生長(zhǎng)20h左右。
　　 實(shí)驗(yàn)采用黑曲霉Wsy-03菌株做為生產(chǎn)菌株，通過(guò)搖床條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)確定了以玉米粉清液為發(fā)酵原料發(fā)酵檸檬酸的

3、最佳營(yíng)養(yǎng)條件：檸檬酸分批發(fā)酵時(shí)，初始總糖濃度18％最合適，最適氮源含量為添加17％的玉米液化全液、同時(shí)添加0.3％的(NH4)2SO4，補(bǔ)料發(fā)酵最佳初糖含量在14％，最佳接種量10％；發(fā)酵最佳初始pH4.5；最適發(fā)酵溫度35℃，可耐最高發(fā)酵溫度40℃；通過(guò)10L全自動(dòng)發(fā)酵罐確定最佳通風(fēng)量：0-24h：0.12 VVM,24-72h：0.15 VVM。黑曲霉Wsy-03在上述最適發(fā)酵條件下，產(chǎn)酸率達(dá)13.99g/100ml，糖酸轉(zhuǎn)化89.

4、91％。。
　　 在研究分批發(fā)酵檸檬酸工藝的基礎(chǔ)上，研究了黑曲霉Wys-03分批補(bǔ)料發(fā)酵的最佳工藝得出以下結(jié)論：在黑曲霉Wys-03檸檬酸發(fā)酵過(guò)程中分別在發(fā)酵24h以后，進(jìn)行第一次補(bǔ)加葡萄糖溶液，發(fā)酵48h以后，進(jìn)行第二次補(bǔ)加葡萄糖溶液，發(fā)酵結(jié)果最優(yōu)。兩次補(bǔ)加葡糖糖溶液的最佳濃度都是2％，同時(shí)在第二次補(bǔ)料液中添加0.3％的(NH)4SO2發(fā)酵結(jié)果最佳。在上述最優(yōu)工藝條件下進(jìn)行黑曲霉Wys-03分批補(bǔ)料發(fā)酵，發(fā)酵最終產(chǎn)酸16.33