光譜分辨多焦點多光子顯微成像系統(tǒng)研究.pdf

1、熒光顯微技術已經(jīng)發(fā)展成為生物醫(yī)學領域的強大工具。熒光具有多參量特性，其中熒光光譜的測量可以鑒別不同種類的熒光團；而熒光壽命測量可以對熒光分子所處微環(huán)境進行定量分析，而且對于鑒別光譜重疊的多組分熒光團非常有效。多焦點多光子顯微技術（Multifocal Multiphoton Microscopy，MMM）可以實現(xiàn)樣品的三維快速多光子激發(fā)熒光顯微成像，并具有對活體樣品損傷小，成像深度大，圖像信噪比高等優(yōu)點。
　　 本論文的研究目標

2、是將基于棱鏡色散的光譜分辨技術和MMM技術結(jié)合，發(fā)展一種能夠快速獲取樣品三維空間光譜信息的多光子激發(fā)熒光顯微測量和成像技術，為多色標記成像、FRET以及熒光比率測量等生物學研究提供了非常重要的檢測手段。本論文的主要研究內(nèi)容是設計并搭建光譜分辨的多焦點多光子顯微成像系統(tǒng)，實現(xiàn)生物樣品的快速三維空間的光譜測量和成像。并進一步研究基于光譜分辨的多焦點多光子熒光壽命成像顯微系統(tǒng)，實現(xiàn)對生物樣品的光譜及壽命測量。本論文具體完成了以下幾方面的研究工

3、作：
　　 1討論了與本課題研究內(nèi)容相關的熒光顯微技術基礎及其發(fā)展現(xiàn)狀。
　　 2設計并搭建了具有光譜分辨功能的多焦點多光子顯微成像系統(tǒng)，能夠?qū)崿F(xiàn)對樣品進行快速三維空間的光譜數(shù)據(jù)采集。
　　 3研究了熒光光譜信息的分析及處理方法，并對光譜分辨多焦點多光子顯微成像系統(tǒng)的光譜分辨率和系統(tǒng)放大倍率等進行了標定。.
　　 4研究了光譜分辨多焦點多光子顯微成像系統(tǒng)的圖像重構方法，實現(xiàn)了強度圖像和不同光譜的強度圖像的