微膠囊固定化東北紅豆杉細(xì)胞生長代謝的研究.pdf

1、為了了解微囊固定化植物細(xì)胞的生長與代謝規(guī)律,為大規(guī)模固定化植物細(xì)胞生產(chǎn)奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ),該文以海藻酸-殼聚糖包埋東北紅豆杉細(xì)胞(Taxuscuspidata),通過對照在不同膠囊包埋條件下與普通懸浮培養(yǎng)細(xì)胞的異同點(diǎn),改變包埋量、包埋載體密度、換液時(shí)間等參數(shù),觀察了微囊化細(xì)胞生長與代謝情況,分析了微囊固定化細(xì)胞產(chǎn)生這些生長與代謝變化的主要影響因素,對膠囊包埋紅豆杉細(xì)胞生長與代謝的影響形成一個(gè)整體的認(rèn)識.得到如下結(jié)果:用海藻酸-殼聚糖膠球包埋東

2、北紅豆杉細(xì)胞時(shí),細(xì)胞受到最大影響在傳質(zhì)方面,細(xì)胞活力下降.海藻酸鈉-殼聚糖液芯膠球和無殼聚糖層的海藻酸鈉膠球作為改進(jìn)包埋方法,有利于保持較高的細(xì)胞存活率和代謝能力,對糖類等營養(yǎng)物質(zhì)的吸收較好.兩者均使細(xì)胞產(chǎn)生一些應(yīng)激反應(yīng),包括細(xì)胞膜通透性增大,胞外蛋白含量增加,培養(yǎng)液出現(xiàn)堿化等.而無論有無殼聚糖層包裹的固芯膠球均比液芯膠球更利于酚類等次生代謝產(chǎn)物的合成與積累.細(xì)胞生長的停滯期換液不能明顯改進(jìn)細(xì)胞存活率以促進(jìn)次生代謝產(chǎn)物的積累.換液后的細(xì)

3、胞所出現(xiàn)的生理現(xiàn)象,包括細(xì)胞膜透性變化、蛋白質(zhì)的吸收與代謝、酚積累等方面表現(xiàn)出與未換液相近似的規(guī)律.選用不同海藻酸鈉載體密度包埋細(xì)胞時(shí),隨著載體密度增大,培養(yǎng)液中的酚積累和電導(dǎo)率增長.20g/L-30g/L是適中的載體密度,有利于保持包埋細(xì)胞較高的活力.細(xì)胞包埋的不同階段,包埋量影響細(xì)胞存活率、營養(yǎng)消耗等的程度不同.高包埋量使細(xì)胞間相互刺激作用較大,有更多胞內(nèi)離子向胞外釋放.包埋量越高,其酚積累的峰值出現(xiàn)越晚.在細(xì)胞的停滯期,酚積累的量