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文檔簡(jiǎn)介
1、以紫杉醇為代表的紫杉烷類(lèi)化合物是一類(lèi)新型的有效的天然抗腫瘤藥物,來(lái)源匱乏,價(jià)格高昂。紅豆杉又稱(chēng)紫杉、赤柏松,為紅豆杉科紅豆杉屬植物,由于含有高效抗癌成分紫杉醇而受到濫砍濫伐,瀕臨滅絕,是國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)植物。尋找更高效、廉價(jià)的紫杉醇來(lái)源以面對(duì)日益增長(zhǎng)的需求,以真菌取代紅豆杉植物,通過(guò)微生物發(fā)酵途徑獲得豐富的紫杉醇來(lái)源是一個(gè)具有巨大發(fā)展空間的方向。
對(duì)南方紅豆杉開(kāi)展了內(nèi)生真菌的分離、篩選,以及產(chǎn)物的抗癌特性研究,目的在于尋找更廣
2、泛的紫杉醇來(lái)源以保護(hù)瀕臨滅絕的紅豆杉資源,獲得有效產(chǎn)生紫杉烷物質(zhì)的目標(biāo)新菌株,同時(shí)開(kāi)發(fā)新的天然藥物,為解決紫杉醇生產(chǎn)中的一些關(guān)鍵問(wèn)題和最終實(shí)現(xiàn)通過(guò)微生物工程生產(chǎn)該藥物奠定研究基礎(chǔ)。
從10年以上樹(shù)齡的南方紅豆杉樹(shù)皮中分離紅豆杉內(nèi)生真菌,獲得了20個(gè)菌種。以紫杉醇(Taxol)為標(biāo)準(zhǔn)品,采用薄層色譜法(TLC)、高效液相色譜法(HPLC)進(jìn)行對(duì)內(nèi)生真菌的代謝產(chǎn)物進(jìn)行分離和分析,從中篩選到了一株青霉菌H⑥.1可能有產(chǎn)紫杉醇類(lèi)化
3、合物的能力。通過(guò)MTT比色分析法研究了H⑥.1的發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)惡性黑色素瘤細(xì)胞A375的抗腫瘤特性。發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制率呈濃度依賴(lài)性,濃度達(dá)到100μg/ml時(shí),細(xì)胞的增殖抑制率達(dá)到50%。初步確證了南方紅豆杉內(nèi)生真菌產(chǎn)物的細(xì)胞毒性。
從該菌株的代謝產(chǎn)物中分離到了一種化合物,采用紅外吸收光譜(IR)、質(zhì)譜(MS)、核磁(1H-NMR、13C-NMR)以及與已知化合物的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)比較,鑒定該化合物為一種震顫毒素Penitre
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