高產谷胱甘肽酵母菌株選育及培養(yǎng)條件研究.pdf

1、山東師范大學碩士學位論文高產谷胱甘肽酵母菌株選育及培養(yǎng)條件研究姓名：陳儉梅申請學位級別：碩士專業(yè)：食品科學指導教師：劉代成袁建國20090402山東師范大學碩士學位論文過對UCl搖瓶培養(yǎng)條件的考察得到較優(yōu)培養(yǎng)條件。三、研究結果1、得到乙醇抽提優(yōu)化條件：溫度為50℃，反應時間90min，乙醇濃度為40％。提取條件優(yōu)化后谷胱甘肽產量為751mg／L，比優(yōu)化前提高了373％。2、確定合適的碳源為工業(yè)用葡萄糖，有機氮源為酵母粉，無機氮源為(NH

2、4)2S04，磷酸鹽為KH2P04和K2HP04。正交試驗確定的最佳培養(yǎng)基組成(g／L)葡萄糖25，酵母粉10，(rrrt425043，K2HP0412，KH2P0418；考察了不同的無機鹽的影響，確定在培養(yǎng)基里添加O3g／L的MgS04。培養(yǎng)基條件優(yōu)化后酵母菌株的谷胱甘肽產量為96mg／L，比優(yōu)化前提高了278％。3、最終得到一株高產谷胱甘肽菌株UCl，谷胱甘肽產量為1694mg／L，比優(yōu)化后菌株CI提高了765％。并獲得胞內谷胱甘肽

3、含量較高的標記性酵母菌株Z5(高濃度氯化鋅培養(yǎng)平板中產生透明圈，ZnCl2r)和C4(淡黃色，Ethr)。其中z5谷胱甘肽產量為121mg／L，比出發(fā)菌株CI優(yōu)化后提高了26％。C4谷胱甘肽產量為127mg／L，比出發(fā)菌株CI優(yōu)化后提高了323％。對標記性的兩親株z5和C4進行單親滅活融合。摸索了原生質體制備和再生的條件及融合條件，經過篩選、鑒定得到融合子R54，其生物量為1049／L，谷胱甘肽產量為157。2mg／L。谷胱甘肽產量比兩