幾種真菌對(duì)稻草生物降解的研究.pdf

1、本文運(yùn)用菌物學(xué)、生物化學(xué)及生物技術(shù)等研究方法對(duì)9個(gè)真菌菌株對(duì)稻草生物降解進(jìn)行研究，篩選出選擇性降解稻草木質(zhì)素的高酶活菌株，對(duì)其產(chǎn)漆酶的培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化，對(duì)所產(chǎn)漆酶進(jìn)行分離純化，測(cè)定了漆酶的部分動(dòng)力學(xué)特征。 通過(guò)PDA-Bavendamm平板顯色反應(yīng)、PDA-RB亮藍(lán)顯色反應(yīng)、變色圈試驗(yàn)對(duì)各菌株對(duì)稻草的生物降解能力進(jìn)行了定性篩選，利用菌株產(chǎn)生的變色圈直徑和菌落直徑的大小來(lái)判斷各菌株對(duì)木質(zhì)素的優(yōu)先降解能力。結(jié)果表明：糙皮側(cè)耳、彩絨革

2、蓋菌、粗毛栓菌3菌株產(chǎn)漆酶及過(guò)氧化物酶能力較強(qiáng)，且優(yōu)先降解木質(zhì)素。在對(duì)稻草15d的降解中，彩絨革蓋菌的木質(zhì)素降解率最高，為24.10％；粗毛栓菌次之，為20.09％。稀硬木層孔菌的綜纖維素降解率最高，為25.62％；糙皮側(cè)耳最低，為2.23％。糙皮側(cè)耳的SF指數(shù)最高，為7.36；粗毛栓菌次之，為2.48。上述3菌株在對(duì)稻草固體基質(zhì)降解60天內(nèi)，粗毛栓菌對(duì)木質(zhì)素的相對(duì)降解率(68.53％)最高，彩絨革蓋菌對(duì)綜纖維素的相對(duì)降解率(78.42

3、％)最高。粗毛栓菌降解木質(zhì)素的選擇性優(yōu)于糙皮側(cè)耳、彩絨革蓋菌，而彩絨革蓋菌降解綜纖維素的選擇性優(yōu)于糙皮側(cè)耳、粗毛栓菌。 液態(tài)、固態(tài)培養(yǎng)產(chǎn)酶活性試驗(yàn)結(jié)果表明，粗毛栓菌為選擇性降解稻草木質(zhì)素的高酶活菌株，為L(zhǎng)ac、Mnp、Hcel的高產(chǎn)菌株，對(duì)天然木質(zhì)纖維素基質(zhì)有很強(qiáng)的降解能力，且分泌漆酶的能力最強(qiáng)。粗毛栓菌產(chǎn)漆酶最佳培養(yǎng)條件為：碳源為蔗糖(5g/L)，氮源為蛋白胨(lg/l)，最適初始pH值為4.0，誘導(dǎo)劑為吐溫-80；母液和發(fā)酵

4、液的最佳培養(yǎng)方式均為振蕩培養(yǎng)。 運(yùn)用8O％硫酸銨鹽析、透析、DEAE-SepharoseFF離子交換層析、SephadexG-75凝膠層析方法對(duì)粗毛栓菌所產(chǎn)漆酶進(jìn)行了分離純化，最終純化倍數(shù)達(dá)12.48，活力回收率為21.4％。該漆酶符合酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)特征。粗漆酶最適反應(yīng)溫度為40℃，純化漆酶為30℃；粗漆酶最適反應(yīng)pH值為5.0，純化漆酶為4.5。金屬離子對(duì)漆酶活力的影響很大，當(dāng)金屬離子濃度為5mmol/L時(shí)，Na+、Zn2+、